-
Маҷмӯи мустақими ҳайвоноти PCR-UNG
Ин маҷмӯа як системаи беназири буферии лизисро барои зуд баровардани ДНК-и геномикӣ аз намунаҳои бофтаи ҳайвонот барои аксуламалҳои ПТР истифода мебарад, аз ин рӯ он барои санҷиши генетикии миқёси калон мувофиқ аст.
Раванди озод кардани ДНК-и геномӣ аз буферии лизис дар тӯли 10-30 дақиқа дар 65 ба анҷом мерасад°C. Ҳеҷ гуна равандҳои дигар, аз қабили нест кардани сафеда ва РНК талаб карда намешаванд ва ДНК-и пайдошуда метавонад ҳамчун қолаби реаксияи ПТР истифода шавад.
2×ПЦР осонTM Mix (UNG) ба ҷои dTTP дар асоси 2 dUTP -ро истифода мебарад×ПЦР осонTM Омехта кунед ва ферментҳои UNG (Uracil-N-glycosylase) -ро илова кунед, ки метавонад қолаби дорои DUTP-ро дар як вақт вайрон кунад. Пеш аз реаксияи ПТР, ферменти УНГ барои паст кардани маҳсулоти ПТР, ки дорои урацил мебошад, истифода мебаранд. Ферментҳои UNG ба шаблоне, ки урасилро дар бар намегирад, таъсир намерасонад ва ба ин васила мушаххасӣ ва дақиқии амплификатсияро пешгирӣ мекунад ва эҳтимолияти олудагии маҳсулоти ПТР-ро ҳангоми ташхиси васеи генетикӣ пешгирӣ мекунад.
Полимеразаи D-Taq ДНК полимерази ДНК мебошад, ки онро Фореген барои реаксияҳои мустақими ПТР махсус таҳия кардааст. Полимерази D-Taq ДНК ба таҳаммулпазирии шадид нисбат ба ингибиторҳои гуногуни реаксияи ПТР таъсир мерасонад ва миқдори микроэлементҳои ДНК-ро дар системаҳои гуногуни реаксияи мураккаб зиёд карда метавонад ва суръати афзоиш метавонад ба 2Kb / min расад, ки ин махсусан барои реаксияи мустақими ПТР мувофиқ аст.
