• Фейсбук
  • Linkedin
  • youtube
саҳифа_баннер

Маҷмӯаи изолятсияи умумии RNA маҷмӯаҳои тозакунии RNA аз ҳуҷайра

Тавсифи маҷмӯа:

Дар давоми 11 дақиқа аз ҳуҷайраҳои гуногуни парваришшуда РНК-и хеле тозашуда ва баландсифатро гирифтан мумкин аст.

RNase-Free

Дар ҳарорати хонагӣ кор мекунад (15-25 ℃)

Бо сутуни тозакунии ДНК

Ҳосили баланди РНК

Зуд: истихроҷро дар 11 дақиқа анҷом диҳед

Бехатарӣ: Ҳеҷ кимиёвии органикӣ

қувваи пешина


  • :
  • Тафсилоти маҳсулот

    Тегҳои маҳсулот

    Саволҳои зиёд такрормешуда

    Тавсифи

    Ин маҷмӯа сутуни чархзанӣ ва формулаи аз ҷониби Foregene таҳияшударо истифода мебарад, ки метавонад аз ҳуҷайраҳои дар 96, 24, 12 ва 6-чоҳ парваришшуда РНК-и тоза ва баландсифатро самаранок истихроҷ кунад.

    Маҷмӯа як сутуни самараноки тозакунии ДНК-ро таъмин мекунад, ки метавонад ба осонӣ супернатант ва лизати ҳуҷайраро ҷудо кунад, ДНК-и геномиро пайваст ва хориҷ кунад.Амалиёт содда ва вақтро сарфа мекунад.

    TВай танҳо Сутуни РНК метавонад РНК-ро бо формулаи беназир пайваст кунад.Шумораи зиёди намунаҳоро дар як вақт коркард кардан мумкин аст.

    Компонентҳои комплект

    Таркиби комплект RE-03111 RE-03114
    50 Т 200 Т
    Буфер cRL1* 25 мл 100 мл
    Буфери cRL2 15 мл 60 мл
    Буфери RW1* 25 мл 100 мл
    Буфери RW2 24 мл 96 мл
    RNase-Free ddH2O 10 мл 40 мл
    RNA-танҳо сутун 50 200
    Сутуни тозакунии ДНК 50 200
    Дастур 1 1

    *Лутфан ҳангоми амалиёт дастпӯшак пӯшед ва чораҳои муҳофизатӣ андешед, зеро буфери cRL1 ва Buffer RW1 дорои намаки хаотропии хашмгин мебошанд.

    Хусусиятҳо ва афзалиятҳо

    ■ Тамоми раванд дар ҳарорати хонагӣ (15-25 ℃), бе ваннаи ях ва центрифугаи ҳарорати паст иҷро карда мешавад.
    ■ Тамоми маҷмӯа RNase-Free аст, дар бораи таназзули РНК хавотир шудан лозим нест.
    ■ Сутуни тозакунии ДНК ДНК-ро махсус мепайвандад, то маҷмӯа метавонад ифлосшавии геномии ДНК-ро бе илова кардани DNase иловагӣ тоза кунад.
    ■ Ҳосили баланди РНК: Сутуни танҳо РНК ва формулаи беназир метавонад РНК-ро самаранок тоза кунад.
    ■ Суръати тез: кор кардан осон ва дар давоми 11 дақиқа ба итмом расонидан мумкин аст.
    ■ Бехатарӣ: Ягон реагенти органикӣ талаб карда намешавад.
    ■ Сифати баланд: РНК-и тозашуда дорои тозагии баланд, аз сафеда ва дигар ифлосиҳо мебошад ва метавонад ба таҷрибаҳои гуногуни минбаъда ҷавобгӯ бошад.

    бартариҳои маҷмӯаи изолятсияи foregene RNA

    Аризаи маҷмӯа

    Он барои истихроҷ ва тозакунии умумии РНК аз ҳуҷайраҳои парваришшуда дар плитаҳои 96, 24, 12 ва 6-чоҳ мувофиқ аст.

    Раванди кор

    РНК-и умумии ҳуҷайра

    Диаграмма

    Маҷмӯаи изолятсияи умумии ҳуҷайраҳои RNA ҷараёни кории 1

    Диаграммаи батареяи гели агарозии маҷмӯаи изолятсияи ҳуҷайраҳои умумии RNA ба миқдори гуногуни ҳуҷайраҳои дар боло зикршуда коркард карда шудааст, 20 мкл ҳаҷм элюсия, 2 мкл тозашудаи РНК 1% -ро мегирад.

    Муҳлати нигоҳдорӣ ва нигоҳдорӣ

    Маҷмӯаро дар ҳарорати хонагӣ (15-25 ℃) ё 2-8 ℃ барои муддати дарозтар (24 моҳ) нигоҳ доштан мумкин аст.

    Буфери cRL1-ро пас аз илова кардани 2-гидрокси-1-этанетиол (ихтиёрӣ) дар 4 ℃ барои 1 моҳ нигоҳ доштан мумкин аст.


  • гузашта:
  • Баъдӣ:

  • РНК истихроҷ карда намешавад ё ҳосили РНК паст аст

    Аксар вақт омилҳои гуногуне мавҷуданд, ки ба самаранокии барқарорсозӣ таъсир мерасонанд, ба монанди: мундариҷаи намунаи RNA бофта, усули кор, ҳаҷми элюсия ва ғайра.

    1. Ҳангоми кор ваннаи ях ё центрифугаи криогенӣ (4 °C) анҷом дода шуд.

    Тавсия: Дар давоми тамоми раванд дар ҳарорати хонагӣ (15-25 ° C) кор кунед, ванна ях накунед ва дар ҳарорати паст центрифуга накунед.

    2. Нигоҳдории нодурусти намуна ё вақти аз ҳад зиёди нигоҳдории намуна.

    Тавсия: Намунаҳоро дар -80 °C нигоҳ доред ё дар нитрогени моеъ ях кунед ва аз истифодаи такрории яхкунӣ худдорӣ кунед;кӯшиш кунед, ки барои истихроҷи РНК бофтаи тару тоза ё ҳуҷайраҳои парваришшударо истифода баред.

    3. Лизиси нокифояи намуна.

    Тавсия: Ҳангоми гомогенизатсияи матоъ, боварӣ ҳосил кунед, ки матоъ ба таври кофӣ гомогенизатсия карда шудааст ва ҳуҷайраҳои бофта барои шарҳ додани озодшавии РНК ба қадри кофӣ тақсим шудаанд.

    4. Элюент дуруст илова карда нашудааст.

    Тавсия: Тасдиқ кунед, ки RNase-Free ddH2О ба мобайни мембранаи сутуни тозакунӣ қатра илова карда мешавад.

    5. Ҳаҷми дурусти этаноли мутлақ ба Buffer RL2 ё Buffer RW2 илова карда нашудааст.

    Тавсия: Дастурҳоро риоя кунед, ҳаҷми дурусти этаноли мутлақро ба Buffer RL2 ва Buffer RW2 илова кунед ва пеш аз истифодаи маҷмӯа хуб омехта кунед.

    6. Миқдори намунаи матоъ мувофиқ нест.

    Тавсия: 10-20 мг матоъ ё (1-5) × 10 истифода баред6ҳуҷайраҳо барои 500 мкл буфери RL1, зеро истифодаи аз ҳад зиёди бофта метавонад боиси коҳиши истихроҷи РНК гардад.

    7. Ҳаҷми элюсияи номатлуб ё элюсияи нопурра.

    Тавсия: Ҳаҷми элюсияи сутуни тозакунӣ 50-200 мкл;агар таъсири элюсия қаноатбахш набошад, тавсия дода мешавад, ки вақти ҷойгиркунии ҳарорати хонагӣ пас аз илова кардани RNase-Free ddH пешакӣ гармшуда дароз карда шавад.2О, масалан, барои 5-10 дақиқа.

    8.Сутуни тозакунӣ пас аз шустани буферии RW2 боқимондаи этанол дорад.

    Тавсия: Агар пас аз шустани буфери RW2 боқимондаи этанол вуҷуд дошта бошад, центрифугаи холии найча барои 1 дақиқа, вақти амалиёти центрифугакунии найчаи холӣ метавонад то 2 дақиқа зиёд карда шавад ё сутуни тозакунӣ дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа ҷойгир карда шавад, то боқимонда боқимонда тоза карда шавад. этанол.

    РНК-и тозашуда вайрон мешавад

    Сифати РНК-и тозашуда бо омилҳо ба монанди нигоҳдории намуна, ифлосшавии RNase ва манипуляция ва ғайра алоқаманд аст.

    1. Намунахои бофтахо дар вакташ нигох дошта намешаванд.

    Тавсия: Агар намунаҳои матоъ ё ҳуҷайраҳо пас аз ҷамъоварӣ сари вақт истифода нашаванд, фавран дар ҳарорати -80 °C ё нитрогени моеъ криоконсерватсия кунед.Барои истихроҷи РНК, агар имкон бошад, бофтаи нав гирифташуда ё намунаи ҳуҷайраро истифода баред.

    2. Бозобшавии такрории намунаҳои бофта.

    Тавсия: Ҳангоми нигоҳ доштани намунаҳои матоъ, беҳтар аст, ки онҳоро ба қисмҳои хурд барои нигоҳдорӣ буред ва ҳангоми истифодаи онҳо яке аз пораҳоро хориҷ кунед, то такроран яхобшавии намуна ва таназзули РНК пешгирӣ карда шавад.

    3. RNase дар давоми амалиёт ҷорӣ карда мешавад ё пӯшидани дастпӯшакҳои якдафъаина, ниқоб ва ғ.

    Тавсия: Таҷрибаҳои истихроҷи РНК беҳтарин дар утоқҳои алоҳидаи коркарди РНК анҷом дода мешаванд ва ҷадвал пеш аз таҷриба тоза карда мешавад.

    Ҳангоми таҷриба дастпӯшакҳо ва ниқобҳои якдафъаина пӯшед, то таназзули РНК, ки дар натиҷаи ворид кардани RNase ба вуҷуд омадааст, кам кунед.

    4. Ҳангоми истифода реактивҳо бо RNase олуда мешаванд.

    Тавсия: Бо маҷмӯаи нави изолятсияи умумии RNA Animal барои таҷрибаҳои алоқаманд иваз кунед.

    5. Қубурҳои центрифуга, маслиҳатҳо ва ғайра, ки дар коркарди РНК истифода мешаванд, бо RNase олуда шудаанд.

    Тавсия: Тасдиқ кунед, ки қубурҳои центрифугаҳо, маслиҳатҳо, пипеткаҳо ва ғ., ки дар истихроҷи РНК истифода мешаванд, ҳама аз RNase озоданд.

    РНК-и тозашуда ба таҷрибаҳои поёноб таъсир мерасонад

    РНК, ки аз ҷониби сутуни тозакунӣ тоза карда шудааст, агар ионҳои намак, миқдори сафеда хеле калон бошад, ба таҷрибаи поёноб таъсир мерасонад, ба монанди: транскрипсияи баръакс, Northern Blot et al.

    1. РНК-и элюсияшуда дорои пасмондаҳои ионҳои намак мебошад.

    Тавсия: Тасдиқ кунед, ки ҳаҷми дурусти этанол ба буфери RW2 илова карда шудааст ва 2 шустушӯи сутуни тозакуниро бо суръати центрифугаи барои кор нишондода анҷом диҳед;агар ягон боқимондаи ионҳои намак мавҷуд бошад, сутуни тозакуниро дар буфери RW2 барои 5 дақиқа дар ҳарорати хонагӣ гузоред ва центрифугаро анҷом диҳед, то ҳадди аксар бартараф кардани ифлосшавии намакро анҷом диҳед.

    2. Боқимондаи этанол дар РНК-и элютсионӣ.

    Тавсия: Тасдиқ кунед, ки пас аз шустани буфери RW2, амалиёти центрифугакунии холии қубурро бо суръати центрифугакунӣ, ки барои кор нишон дода шудааст, иҷро кунед, вақти амалиёти центрифугакунии найчаи холиро то 2 дақиқа зиёд кунед, агар боқимондаи этанол вуҷуд дошта бошад ё онро дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа гузоред. м

    Паёми худро дар ин ҷо нависед ва ба мо бифиристед