Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Бо gDNase)(Super Premix барои синтези аввалини cDNA аз lncRNA)
Мушаххасоти
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Бо gDNase) як системаи транскрипсияи баръакс мебошад, ки махсус барои lncRNA барои зуд бартараф кардани ифлосшавии геномии ДНК таҳия шудааст.5×gDNase Mix метавонад геноми боқимондаи РНК-ро дар 42°C дар тӯли 2 дақиқа зуд тоза карда, аз дахолати геном дар натиҷаҳои qPCR ба таври муассир канорагирӣ кунад.
5×L-RT HeroTM Mix дорои Foregene LncRNA Reverse Transkriptase, ки махсус аз ҷониби Foregene таҳия шудааст, як навъи нави транскриптазаи баръакс барои lncRNA ва дигар қолибҳои мураккаби RNA мебошад, ки бо наздикии қавитари RNA ва самаранокии сабти баръакс баландтар аст.Системаи оптимизатсияшуда суръати транскрипсияи баръаксро тезтар мекунад ва метавонад қолибҳои RNA-ро бо мундариҷаи баланди GC ва сохтори мураккаби дуюмдараҷа ба осонӣ транскрипсия кунад.Синтези аввалини cDNA-ро дар 42°С дар 15 дақиқа анҷом додан мумкин аст.
Компонентҳои комплект
| 5× Омехтаи gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-Free ddH2O |
| Дастурҳо |
Хусусиятҳо ва афзалиятҳо
■Қобилияти самараноки хориҷ кардани gDNA, ки метавонад gDNA-ро дар қолаб дар давоми 2 дақиқа хориҷ кунад.
■ Он метавонад транскрипсияи lncRNA-ро самаранок баргардонад.Вақте ки маҳсулоти транскрипсияи баръакс ба qPCR дучор мешавад, арзиши Ct нисбат ба системаи анъанавии транскрипсияи баръакс пасттар аст.
■ Системаи самараноки транскрипсияи баръакс, барои анҷом додани синтези риштаи якуми cDNA ҳамагӣ 15 дақиқа вақт лозим аст.
■ Шаблонҳои мураккаб: қолабҳои дорои мундариҷаи баланди GC ва сохтори мураккаби дуюмдараҷа низ метавонанд бо самаранокии баланд баргардонида шаванд.
■ Системаи ҳассосияти баланди транскрипсияи баръакс, қолибҳои сатҳи pg инчунин метавонанд cDNA-и баландсифат гиранд.
■ Системаи транскрипсияи баръакс устувории баланди гармӣ дорад, ҳарорати оптималии реаксия 42 аст℃, ва он то ҳол иҷрои хуби транскрипсияи баръакс дар 50 дорад℃.
Аризаи маҷмӯа
Таҳлили нисбии миқдорӣ lncRNA.
Таҳлили миқдори мутлақ lncRNA.
Он метавонад РНК-ро ба монанди вируси РНК зуд ва дақиқ таҳлил кунад.
Транскрипсияи баръакси қолибҳои RNA бо мундариҷаи баланди GC ё сохтори мураккаби дуввум.
Раванди кор
Нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ
Маҷмӯа бояд дар -20 нигоҳ дошта шавад°C. Маҳсулотро дар яхдони ҳарорати доимӣ дар -20 нигоҳ доред°C фавран пас аз гирифтани.Агар шароити нигоҳдорӣ мувофиқ бошад, маҳсулот дар тӯли 1 сол ҳеҷ гуна корҳоро паст намекунад.
Дастури таҳлили мушкилот
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-тақвияти мушаххас
1. Тарҳрезии ибтидоии беасос
Тавсия: Примерҳоро мувофиқи принсипҳои тарҳрезии ибтидоӣ тарроҳӣ кунед.
2. Боқимондаҳои геномӣ.
Пешниҳод: Боварӣ ҳосил кунед, ки қадами аввалини ҳарорати реаксияи бартараф кардани gDNA 42°C аст ва вақти реаксияро низ то 5 дақиқа дароз кардан мумкин аст.
Ягон сигнали пурқувват аз ҷониби RT-qPCR
1. РНК вайрон мешавад.
Тавсия: Мавод барои истихроҷи РНК бояд то ҳадди имкон тару тоза бошад ва РНК-и баландсифат ва покиза истифода шавад.
2. РНК дорои ингибиторҳо мебошад.
Тавсия: Ингибиторҳои транскрипсияи баръакс одатан SDS, намакҳои гуанидин, EDTA ва ғайраҳоро дар бар мегиранд. Тавсия дода мешавад, ки преципитат РНК-ро бо 70% этанол шустани ингибиторҳо.
3. Масъалаҳои тарҳрезии ибтидоӣ.
Тавсия: Мувофиқи принсипи тарҳрезии ибтидоӣ, тарҳрезии праймерҳоро барои санҷиш аз нав тарҳрезӣ кунед.
Банди мақсаднок дар назорати холӣ пайдо мешавад
1. Ифлосшавии асбобҳо ё реактивҳои истифодашаванда.
Тавсия: Ҳама реактивҳо ё таҷҳизот барои таҷриба бояд автоклав карда шаванд.Ҳангоми коркард эҳтиёткор ва нарм бошед, то ки намунаҳои ДНК ба пипетка нарезанд ё аз найчаи центрифуга рехта шаванд.
2. Ҳангоми тайёр кардани системаи реаксияи PCR ифлосшавӣ ба амал омад.
Тавсия: Ҳангоми коркард чораҳои эҳтиётии заруриро андешед, масалан: пӯшидани дастпӯшакҳои латекс, бо истифода аз маслиҳатҳои филтр.Миксҳои Real Time PCR-ро дар системаи ифлосшавӣ истифода баред.
3. Примерҳо хароб шудаанд.
Пешниҳод: электрофорези SDS-PAGE-ро барои муайян кардани вайрон шудани праймерҳо истифода баред ва бо праймерҳои нав барои таҷрибаҳои муайянкунии флуорессенсия иваз кунед.
Дастури дастурӣ:
Lnc-RT HeroTM I(Бо gDNase)(Super Premix барои синтези аввалини cDNA аз lncRNA) Дастури дастурӣ
