Антиденоҳо, ки онро иммуноглобулинҳо (Ig) низ меноманд, гликопротеинҳо мебошанд, ки махсусан ба антигенҳо мепайванданд.
 
Омодасозии анъанавии антитело тавассути иммунизатсияи ҳайвонот ва ҷамъоварии зидди зардоб истеҳсол карда мешавад.Аз ин рӯ, антизерум одатан дорои антителоҳои зидди дигар антигенҳои ба ҳам алоқаманд ва дигар ҷузъҳои сафедаи хуноба мебошад.Молекулаҳои антигени умумӣ асосан эпитопҳои гуногунро дар бар мегиранд, аз ин рӯ антителоҳои муқаррарӣ инчунин омехтаи антитело бар зидди эпитопҳои гуногун мебошанд.Ҳатто антителоҳои анъанавии хуноба, ки бар зидди як эпитоп нигаронида шудаанд, ҳанӯз ҳам аз антителоҳои гетерогенӣ, ки аз ҷониби клонҳои гуногуни ҳуҷайраҳои В тавлид мешаванд, иборатанд.Аз ин рӯ, антителоҳои анъанавии хуноба инчунин антителоҳои поликлоналӣ ё антителоҳои поликлоналӣ номида мешаванд.
 
Антиденои моноклоналӣ (антителоҳои моноклоналӣ) як антитело хеле якхела аст, ки аз ҷониби як клони ҳуҷайраи В тавлид мешавад ва танҳо бар зидди эпитопи мушаххас нигаронида шудааст.Он одатан бо технологияи гибридома омода карда мешавад - технологияи антитело гибридома ба технологияи синтези ҳуҷайра асос ёфтааст, ки ҳуҷайраҳои B-ро бо қобилияти ҷудо кардани антителоҳои мушаххас ва ҳуҷайраҳои миелома бо қобилияти бепоёни афзоиш ба гибридомаҳои B-ҳуҷайра муттаҳид мекунад.Ин ҳуҷайраи гибридома дорои хусусиятҳои ҳуҷайраи волидайн мебошад.Он метавонад ба таври номуайян ва ҷовидона дар vitro ба монанди ҳуҷайраҳои миелома паҳн шавад ва антителоҳои мушаххасро ба монанди лимфоситҳои испурч синтез ва ҷудо кунад.Тавассути клонкунӣ хати моноклоналиро, ки аз як ҳуҷайраи гибридомӣ, яъне хати гибридомӣ гирифта шудааст, ба даст овардан мумкин аст.Антиденоҳое, ки аз он тавлид мекунанд, зидди як детерминант, яъне антителоҳои моноклоналӣ антителоҳои хеле якхела мебошанд.
 
Антителоҳо ҳамчун як ё якчанд мономерҳои Y-шакл мавҷуданд (яъне антителоҳои моноклоналӣ ё антителоҳои поликлоналӣ).Ҳар як мономери Y-шакл аз 4 занҷири полипептидӣ, аз ҷумла ду занҷири якхелаи вазнин ва ду занҷири сабуки якхела иборат аст.Занҷири сабук ва занҷири вазнин аз рӯи вазни молекулавии худ номгузорӣ мешаванд.Қисми болоии сохтори Y-шакл минтақаи тағирёбанда аст, ки макони ҳатмии антиген мебошад.(Иқтибос аз консепсияи антителоҳои био-моноклоналӣ)
 
Сохтори антитело
Занҷири вазнин
Панҷ намуди занҷирҳои вазнини ширхӯрон Ig мавҷуданд, ки бо ҳарфҳои юнонӣ α, δ, ε, γ ва μ ном доранд.Антиденаҳои мувофиқ IgA, IgD, IgE, IgG ва IgM номида мешаванд.Занҷирҳои гуногуни вазнин аз рӯи ҳаҷм ва таркиб фарқ мекунанд.α ва γ тақрибан 450 аминокислотаҳо доранд, дар ҳоле ки μ ва ε тақрибан 550 аминокислотаҳо доранд.
Ҳар як занҷири вазнин ду минтақа дорад: минтақаи доимӣ ва минтақаи тағйирёбанда.Ҳама антителоҳои як намуди як минтақаи доимӣ доранд, аммо байни антителоҳои намудҳои гуногун фарқиятҳо мавҷуданд.Минтақаҳои доимии занҷирҳои вазнин γ, α ва δ аз се домени Ig дар тандем иборат буда, бо минтақаи ҳалқа барои баланд бардоштани чандирии он;минтақаҳои доимии занҷирҳои вазнин μ ва ε аз 4 доменҳои Ig иборатанд.Минтақаи тағирёбандаи занҷири вазнини антитело, ки аз ҷониби ҳуҷайраҳои гуногуни В тавлид шудааст, гуногун аст, аммо минтақаи тағирёбандаи антитело, ки аз ҷониби як ҳуҷайраи В ё клони ҳуҷайра тавлид шудааст, якхела аст ва минтақаи тағирёбандаи ҳар занҷири вазнин тақрибан 110 аминокислотаи аминокислотаҳо мебошад., Ва домени ягонаи Ig ташкил кунед.
 
Занҷираи сабук
Дар ширхӯрон танҳо ду намуди занҷирҳои сабук мавҷуданд: навъи ламбда ва навъи каппа.Ҳар як занҷири сабук ду домени ба ҳам алоқаманд дорад: минтақаи доимӣ ва минтақаи тағирёбанда.Дарозии занҷири сабук тақрибан 211 ~ 217 аминокислотаҳо аст.Ду занҷири сабуке, ки дар ҳар як антитело мавҷуданд, ҳамеша якхелаанд.Барои ширхӯрон, занҷири сабук дар ҳар як антитело танҳо як намуд дорад: каппа ё ламбда.Дар баъзе аз сутунмӯҳраҳои поёнӣ, аз қабили моҳиҳои пайҳо (моҳии пайҳо) ва моҳиҳои устухондор, навъҳои дигари занҷирҳои сабук, аз қабили навъи iota (iota) низ вомехӯранд.
 
Сегментҳои Fab ва Fc
Сегменти Fc метавонад мустақиман бо ферментҳо ё рангҳои флуоресцентӣ барои нишон додани антителоҳо якҷоя карда шавад.Ин қисмест, ки антитело дар ҷараёни ELISA ба табақ мепайвандад ва он инчунин қисмест, ки антитело дуюм дар иммунопреципитация, иммуноблоттинг ва иммуногистохимия эътироф ва пайваст карда мешавад.Антиденоҳоро метавон ба ду сегменти F(ab) ва як сегменти Fc тавассути ферментҳои протеолитикӣ ба монанди папаин гидролиз кард ё онҳоро аз минтақаи ҳалқа тавассути пепсин шикастан ва ба як сегменти F(ab)2 ва як сегменти Fc гидролиз кардан мумкин аст.Фрагментҳои антителоҳои IgG баъзан хеле муфиданд.Аз сабаби набудани сегменти Fc, сегменти F(ab) бо антиген таҳшин нахоҳад шуд ва дар таҳқиқоти in vivo он аз ҷониби ҳуҷайраҳои иммунӣ гирифта намешавад.Аз сабаби пораҳои хурди молекулавӣ ва набудани функсияи байниҳамдигарӣ (аз сабаби набудани сегменти Fc), сегменти Fab одатан барои тамғагузории радио дар таҳқиқоти функсионалӣ истифода мешавад ва сегменти Fc асосан ҳамчун агенти блокатор дар рангкунии гистохимиявӣ истифода мешавад.
 
Минтақаҳои тағйирёбанда ва доимӣ
Минтақаи тағирёбанда (минтақаи V) дар 1/5 ё 1/4 (дар таркибаш 118 боқимондаи аминокислотаҳо) занҷири H дар наздикии N-терминус ва 1/2 (дар таркибаш тақрибан 108-111 боқимондаи аминокислотаҳо) дар наздикии N-терминуси занҷири L ҷойгир аст.Ҳар як минтақаи V як ҳалқаи пептидӣ дорад, ки аз пайвандҳои дисульфидҳои дохили занҷир ба вуҷуд омадааст ва ҳар як ҳалқаи пептидӣ тақрибан аз 67 то 75 боқимондаи кислотаи аминокислотаҳо дорад.Таркиб ва ҷойгиршавии аминокислотаҳо дар минтақаи V хусусияти ҳатмии антигенро муайян мекунад.Ба туфайли намудҳо ва пайдарпайии аминокислотаҳо дар минтақаи V, ки доимо тағйир меёбанд, намудҳои зиёди антитело бо хусусиятҳои гуногуни антигени ҳатмӣ ба вуҷуд меоянд.Минтақаҳои V-и занҷири L ва H мутаносибан VL ва VH номида мешаванд.Дар VL ва VH, таркиби аминокислотаҳо ва пайдарпаии баъзе минтақаҳои маҳаллӣ дараҷаи баланди тағирот доранд.Ин минтақаҳоро минтақаҳои гипертағйирёбанда (HVR) меноманд.Таркиби аминокислотаҳо ва ҷойгиршавии қисмҳои ғайри HVR дар минтақаи V нисбатан консервативӣ мебошанд, ки онро минтақаи чаҳорчӯба меноманд.Дар VL се минтақаи гипертағйирёбанда мавҷуданд, ки одатан дар боқимондаҳои аминокислотаҳо мутаносибан аз 24 то 34 ва 89 то 97 ҷойгиранд.Се HVR-и VL ва VH мутаносибан HVR1, HVR2 ва HVR3 номида мешаванд.Тадқиқот ва таҳлили дифраксияи кристаллии рентгенӣ исбот кард, ки минтақаи гипертағйирёбанда воқеан ҷойест, ки антигени антитело мепайвандад, бинобар ин онро минтақаи муайянкунандаи комплементарӣ (CDR) меноманд.HVR1, HVR2 ва HVR3-и VL ва VH-ро мутаносибан CDR1, CDR2 ва CDR3 номидан мумкин аст.Умуман, CDR3 дорои дараҷаи баланди гипервариантӣ мебошад.Минтақаи гипертағйирёбанда инчунин макони асосиест, ки дар он детерминантҳои идиотипии молекулаҳои Ig мавҷуданд.Дар аксари ҳолатҳо, занҷири H дар пайвастшавӣ ба антиген нақши муҳимтар дорад.
Минтақаи доимӣ (минтақаи C)дар 3/4 ё 4/5 (тақрибан аз аминокислотаи аминокислотаи 119 то терминали C) занҷири H дар наздикии охири C ва 1/2 (дар таркибаш тақрибан 105 боқимондаи кислотаи аминокислотаҳо) дар наздикии охири C-и занҷири L ҷойгир аст.Ҳар як минтақаи функсионалии занҷири H тақрибан 110 боқимондаи аминокислотаҳо дорад ва дорои як ҳалқаи пептидӣ, ки аз 50-60 боқимондаҳои аминокислотаҳо иборат аст, ки бо пайвандҳои дисульфидӣ пайваст мешаванд.Таркиби аминокислотаҳо ва ҷойгиршавии ин минтақа дар як занҷири Ig изотипи L ва як занҷири навъи H нисбатан доимӣ мебошанд.Ҳамин тавр, он метавонад танҳо бо антигени мувофиқ пайваст шавад, аммо сохтори минтақаи С якхела аст, яъне антигении якхела дорад.Антиденои дуюмдараҷаи IgG-и одамро (ё антитело) аспро бо ду омезиши антитело (IgG) бар зидди экзотоксинҳои гуногун муттаҳид кардан мумкин аст.Ин асоси муҳим барои омода кардани антителоҳои дуюмдараҷа ва татбиқи флуоресцеин, изотопҳо, ферментҳо ва дигар антителоҳои тамғадоршуда мебошад.
 
 
Маҳсулоти марбут:
Маҷмӯаи Cell Direct RT-qPCR