• Фейсбук
  • Linkedin
  • youtube

https://www.foreivd.com/animal-total-rna-isolation-kit-product/

Саволҳо бароиМаҷмӯаи изолятсияи умумии RNA Animal

Таҳлили зерини мушкилоте, ки шумо метавонед дар он дучор шаведистихроҷи бофтаи ҳайвонот / ҳуҷайраҳои РНК will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

РНК истихроҷ карда намешавад ё ҳосили РНК паст аст

Аксар вақт омилҳои гуногуне мавҷуданд, ки ба самаранокии барқарорсозӣ таъсир мерасонанд, ба монанди: мундариҷаи намунаи RNA бофта, усули кор, ҳаҷми элюсия ва ғайра.

1. Ҳангоми кор ваннаи ях ё центрифугаи криогенӣ (4 °C) анҷом дода шуд.

Тавсия: Дар давоми тамоми раванд дар ҳарорати хонагӣ (15-25 ° C) кор кунед, ванна ях накунед ва дар ҳарорати паст центрифуга накунед.

2. Нигоҳдории нодурусти намуна ё вақти аз ҳад зиёди нигоҳдории намуна.

Тавсия: Намунаҳоро дар -80 °C нигоҳ доред ё дар нитрогени моеъ ях кунед ва аз истифодаи такрории яхкунӣ худдорӣ кунед;кӯшиш кунед, ки барои истихроҷи РНК бофтаи тару тоза ё ҳуҷайраҳои парваришшударо истифода баред.

3. Лизиси нокифояи намуна.

Тавсия: Ҳангоми гомогенизатсияи матоъ, боварӣ ҳосил кунед, ки матоъ ба таври кофӣ гомогенизатсия карда шудааст ва ҳуҷайраҳои бофта барои шарҳ додани озодшавии РНК ба қадри кофӣ тақсим шудаанд.

4. Элюент дуруст илова карда нашудааст.

Тавсия: Тасдиқ кунед, ки RNase-Free ddH2О ба мобайни мембранаи сутуни тозакунӣ қатра илова карда мешавад.

5. Ҳаҷми дурусти этаноли мутлақ ба Buffer RL2 ё Buffer RW2 илова карда нашудааст.

Тавсия: Дастурҳоро риоя кунед, ҳаҷми дурусти этаноли мутлақро ба Buffer RL2 ва Buffer RW2 илова кунед ва пеш аз истифодаи маҷмӯа хуб омехта кунед.

6. Миқдори намунаи матоъ мувофиқ нест.

Тавсия: 10-20 мг матоъ ё (1-5) × 10 истифода баред6ҳуҷайраҳо барои 500 мкл буфери RL1, зеро истифодаи аз ҳад зиёди бофта метавонад боиси коҳиши истихроҷи РНК гардад.

7. Ҳаҷми элюсияи номатлуб ё элюсияи нопурра.

Тавсия: Ҳаҷми элюсияи сутуни тозакунӣ 50-200 мкл;агар таъсири элюсия қаноатбахш набошад, тавсия дода мешавад, ки вақти ҷойгиркунии ҳарорати хонагӣ пас аз илова кардани RNase-Free ddH пешакӣ гармшуда дароз карда шавад.2О, масалан, барои 5-10 дақиқа.

8.Сутуни тозакунӣ пас аз шустани буферии RW2 боқимондаи этанол дорад.

Тавсия: Агар пас аз шустани буфери RW2 боқимондаи этанол вуҷуд дошта бошад, центрифугаи холии найча барои 1 дақиқа, вақт барои амалиёти центрифугакунии холии найча метавонад то 2 дақиқа зиёд карда шавад ё сутуни тозакунӣ метавонад дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа ҷойгир карда шавад, то ки боқимондаи этанол хориҷ карда шавад.

РНК-и тозашуда вайрон мешавад

Сифати РНК-и тозашуда бо омилҳо ба монанди нигоҳдории намуна, ифлосшавии RNase ва манипуляция ва ғайра алоқаманд аст.

1. Намунахои бофтахо дар вакташ нигох дошта намешаванд.

Тавсия: Агар намунаҳои матоъ ё ҳуҷайраҳо пас аз ҷамъоварӣ сари вақт истифода нашаванд, фавран дар ҳарорати -80 °C ё нитрогени моеъ криоконсерватсия кунед.Барои истихроҷи РНК, агар имкон бошад, бофтаи нав гирифташуда ё намунаи ҳуҷайраро истифода баред.

2. Бозобшавии такрории намунаҳои бофта.

Тавсия: Ҳангоми нигоҳ доштани намунаҳои матоъ, беҳтар аст, ки онҳоро ба қисмҳои хурд барои нигоҳдорӣ буред ва ҳангоми истифодаи онҳо яке аз пораҳоро хориҷ кунед, то такроран яхобшавии намуна ва таназзули РНК пешгирӣ карда шавад.

3. RNase ҷорӣ карда мешавад ё напӯшидани дастпӯшакҳои якдафъаина, ниқобҳо ва ғ.

Тавсия: Таҷрибаҳои истихроҷи РНК беҳтарин дар утоқҳои алоҳидаи коркарди РНК анҷом дода мешаванд ва ҷадвал пеш аз таҷриба тоза карда мешавад.

Ҳангоми озмоиш дастпӯшакҳо ва ниқобҳои якдафъаина пӯшед, то таназзули РНК, ки дар натиҷаи ворид кардани RNase ба вуҷуд омадааст, кам кунед.

4. Ҳангоми истифода реактивҳо бо RNase олуда мешаванд.

Тавсия: Бо маҷмӯаи нави изолятсияи RNA Animal Total RNA барои таҷрибаҳои алоқаманд иваз кунед.

5. Қубурҳои центрифуга, маслиҳатҳо ва ғайра, ки дар коркарди РНК истифода мешаванд, бо RNase олуда шудаанд.

Тавсия: Тасдиқ кунед, ки қубурҳои центрифуга, маслиҳатҳо, пипеткаҳо ва ғ., ки дар истихроҷи РНК истифода мешаванд, ҳама аз RNase озоданд.

РНК-и тозашуда ба таҷрибаҳои поёноб таъсир мерасонад

РНК, ки аз ҷониби сутуни тозакунӣ тоза карда шудааст, агар ионҳои намак, миқдори сафеда хеле калон бошад, ба таҷрибаи поёноб таъсир мерасонад, ба монанди: транскрипсияи баръакс, Northern Blot et al.

1. РНК-и элюсияшуда дорои пасмондаҳои ионҳои намак мебошад.

Тавсия: Тасдиқ кунед, ки ҳаҷми дурусти этанол ба буфери RW2 илова карда шудааст ва 2 шустушӯи сутуни тозакуниро бо суръати центрифугаи барои кор нишондода анҷом диҳед;агар ягон боқимондаи ионҳои намак мавҷуд бошад, сутуни тозакуниро дар буфери RW2 барои 5 дақиқа дар ҳарорати хонагӣ гузоред ва центрифугаро анҷом диҳед, то ҳадди аксар бартараф кардани ифлосшавии намакро анҷом диҳед.

2. Боқимондаи этанол дар РНК-и элютсионӣ.

Тавсия: Тасдиқ кунед, ки пас аз шустани буфери RW2, амалиёти центрифугакунии холии найчаро бо суръати барои кор нишондодашуда иҷро кунед, вақти амалиёти центрифугакунии холии найчаро то 2 дақиқа зиёд кунед, агар боқимондаи этанол вуҷуд дошта бошад ё онро дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа пас аз аз нав барқарор кардани найчаи холии центрифугатсия гузоред.

Ҷудокунии намудҳои намунаи кислотаи nulceic

Маҷмӯаҳои изолятсияи RNA-и Foregene метавонанд изолятсияи пурраи РНК-ро аз манбаи намунаҳои зерин ба даст оранд: бофтаи ҳайвонот, растанӣ, ҳуҷайраҳо, вирусӣ, хун ва ғайра.

Чӣ тавр ман маҷмӯаро нигоҳ медорам

Нигоҳдории ҳарорати хонагӣ барои 24 моҳ.


Вақти интишор: 01-01-2022