Дар бораи истихроҷи РНК

Сӣ сол пеш, барои истихроҷи РНК, он чизе ки мо фикр мекардем, танҳо чӣ гуна ба даст овардани РНК-и мукаммал буд, аммо ҳеҷ гуна талабот барои суръати истихроҷ вуҷуд надошт (Технологияи насли аввал усули Тризол таваллуд шудааст).Бо навсозии такрории технологияи истихроҷи РНК, он чизе ки мо карда метавонем, бо ба даст овардани натиҷаҳо маҳдуд нест.Вақте ки бо истихроҷи реагентҳои насли якум дар асоси Тризол рӯбарӯ мешуданд, таҷрибаомӯзон аз қадамҳои душвори амалиёти он ба ташвиш афтоданд;гарчанде пас аз бисёр оптимизатсия ва навовариҳо, он ҳанӯз ҳам вақти зиёдеро талаб мекард.Дар баробари ин, дар раванди истихроҷ реагентҳои органикӣ, аз қабили фенол ва хлороформро истифода бурдан лозим аст, ки ин ҳам ба амнияти кормандони дахлдор то андозае таҳдид мекунад.

Самаранок, қулай ва бехатар

Ҷустуҷӯи маҳсулоти самаранок, қулай ва бехатари истихроҷи РНК ҳадафи асосии таҷрибаомӯзон шудааст.Аз ин рӯ, усули адсорбсияи Silica Spin Column барои истихроҷи РНК ба вуҷуд омад.Маҳсулоти истихроҷи RNA-и насли сеюми Foregene аз бартариҳои маҳсулоти истихроҷи сутуни насли қаблӣ истифода мебаранд (танҳо DNA-Cleaning + RNA) ду технологияи Spin Column барои тоза кардани gDNA ва партовҳои матоъ дар як вақт бе коркарди DNase бо gDNA боқимонда ва дигар истифода набаранд фенол ва ғайра. таназзул.

Ҷадвали муқоисаи раванди амалиёт

Ҷадвали муқоисаи натиҷаҳои таҷрибавӣ

Маҷмӯаи изолятсияи умумии RNA Foregene дорои ҳосили баланди истихроҷи РНК, тозагии хуб аст ва таъсири истихроҷи miRNA нисбат ба дигар маҷмӯаҳои бренди беҳтар аст.

Электрофорези 50 мг РНК-и умумии ҷигари муш бо усулҳои гуногун истихроҷ карда мешавад
Насли аввал (1: Тризол)
Насли дуюм (2: маҷмӯаи истихроҷи РНК аз ширкати A)
Насли сеюм (3: маҷмӯаи истихроҷи РНК плюс аз ширкати A, 4: Foregene: Маҷмӯаҳои изолятсияи RNA)

Графикаи qPCR (графики каҷи пурқувват)

Ҳангоми истихроҷи РНК ДНК-и геномӣ бояд ба таври муассир хориҷ карда шавад, вагарна он ба таҷрибаҳои поёноб таъсири идоранашаванда хоҳад дошт (қимати барвақти КТ, мусбатҳои бардурӯғ).Маҷмӯаи насли ояндаи Foregene метавонад ДНК-и геномиро бе иловаи DNase ба таври комил хориҷ кунад ва вақти зиёдро сарфа кунад ва ҳамзамон аз таназзули ифлосшавии экзогении RNase пешгирӣ кунад.
Насли аввал (сабз TRlzol-, сурх TRlzol+-ро нишон медиҳад)

Насли дуюм (Кабуд маънои ширкати A маҷмӯаи истихроҷи РНК -ро нишон медиҳад -, сурх ба ширкати A маҷмӯи истихроҷи РНК +)

Насли сеюм (кабуд маънои ширкати A маҷмӯаи истихроҷи RNA-ро нишон медиҳад, сабз маҷмӯи изолятсияи Foregene RNA-ро нишон медиҳад)

(Эзоҳ: "_" дар графики qPCR нишон медиҳад, ки DNase илова нашудааст ва ифлосшавии ДНК хориҷ карда нашудааст; "+" нишон медиҳад, ки DNase илова карда шудааст ва ифлосшавии ДНК хориҷ карда шудааст)

Истихроҷи РНК дар давоми 11 дақиқа

Барои солҳои зиёд ҷамъ овардани таҷрибаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ лозим нест, маҳсулоти силсилаи маҷмӯаҳои изолятсияи RNA-и баландсифати Foregene ба шумо имкон медиҳанд, ки дар давоми 11 дақиқа РНК-и ҳосили баланд ва тозаи баландро ба даст оред, то эҳтиёҷоти гуногуни таҷрибавии поёнобро қонеъ кунед.

То ба ҳол, маҳсулоти силсилаи маҷмӯи RNA изолятсияи Foregene аз ҷониби шумораи зиёди муштариён эътироф карда шуда, дар бисёр адабиётҳои баландбаҳо саҳм гузоштаанд.Истифодаи воқеии муштарӣ аз диаграммаи электрофорези фикру мулоҳиза ва хатти миқдорӣ тақвияти PCR пас аз транскрипсияи баръакс нишон медиҳад, ки РНК, ки тавассути истифодаи маҳсулоти Foregene истихроҷ шудааст, на танҳо консентратсияи баланд, балки якпорчагии хуб низ дорад.Танҳо технологияи маҳсулоте, ки аз ҷониби бозор санҷида шудааст, метавонад ба ҳама маъқул бошад.

Маҷмӯаи изолятсияи умумии RNA ҳуҷайра

Ҳосили баланди РНК

Зуд: Изолятсияи РНК-ро дар 11 дақиқа анҷом диҳед

Бехатарӣ: Ҳеҷ гуна кимиёвии органикӣ илова карда нашудааст

Баъзе иқтибосҳои баҳои баланд:

1. Юан Фан, Зечжун Лю, Ян Цю ва дигарон.Пешгирии супрессори вирусии сафедаҳои RNAi аз ҷониби пептидҳои тарроҳӣ аз сирояти энтеровирусӣ дар vivo муҳофизат мекунад, Immunity, 54(10), 2021: 2231-2244.e6.(Агар: 31.745,Маҷмӯаи изолятсияи вирусии РНК， Cat №RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Рен, Ю., Ванг, А., Ву, Д. ва дигарон.Моҳияти дугонаи иммунитети модарзодӣ ва апоптоз аз ҷониби протеини ситомегаловируси инсон UL37x1 имкон медиҳад, ки репликатсияи самараноки вирус.Nat Microbiol 7, 1041–1053 (2022).(Агар: 30.964,Маҷмӯаи изолятсияи умумии RNA ҳуҷайра， Cat №RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6