Озмоиши лабораторӣ аз ҷамъоварии намуна оғоз мешавад ва ҷамъоварии намуна осонтарин нодида гирифта мешавад.Чизи аз ҳама муҳим барои ҷамъоварии намуна ин интихоби навъи дурусти намуна, истифодаи абзорҳои мувофиқи интихоб ва анҷом додани интиқол ва коркарди оқилона мебошад.

I. Навъи намуна

Намудҳои маъмули намуна инҳоянд:

Усули интихоб метавонад ба мушаххасоти техникии мониторинги экологии коронавируси нав дар бозори савдои кишоварзӣ (бозор) ишора кунад”:

1. Намунаҳои тампон аз тампонҳои гулӯ, дастҳо, либосҳо ва дигар ашёи табибон: бояд маҳлули муҳофизаткунандаи вирусро дар найчаи намунагирии вирус истифода барад ва ба тампонҳои пахтаи намунавӣ пурра ворид карда шавад.Руи замин) такроран пошида, зиёда аз 3 маротиба шуста мешавад.Дар баробари ин, дар сатхи объекти интихобшуда намунаи бисёрнуқтаи тақсимшударо анҷом додан лозим аст.

2. Намунаҳои тампон аз рӯи ғизо: Намунаҳои ғизоро мустақиман ҷамъоварӣ кардан мумкин нест.Ғизои ҷамъоварӣ бояд бодиққат ҷудо карда шавад ва пеш аз ҷамъоварии намунаҳои тампон дар халтаи тоза нигоҳ дошта шавад.Зарур аст, ки маҳлули муҳофизати вирусро дар найчаи намунагирии вирус истифода баред, пас аз пурра тар кардани тампончаи пахтаи намунавӣ, такроран молидан ва шустани сатҳи намунаи ғизои ҷамъовардашуда зиёда аз 3 маротиба.Дар баробари ин, дар сатхи намуна намунагирии бисёрнуқтаҳои тақсимшударо анҷом додан лозим аст.

3. Намунаҳои канализатсия: Мувофиқи тақсимоти системаи дренажӣ дар бозор, 2-3 макони намунагирии оби канализатсияро интихоб кунед, ки диққати худро ба ҷамъоварии шабакаи қубурҳои дохилӣ, поёни самти ҷараёни об ё пайвастшавӣ бо шабакаи қубурҳои мунисипалӣ равона кунед.Барои ҷамъоварӣ кардани намунаи тампон, онро бо тампончаи пахтаи намунавӣ ба канализатсия гузоред, то он обро адсорб кунад ва онро дар найчаи намунагирӣ зиёда аз 3 маротиба бишӯед.Барои ҷамъоварии намунаҳои обҳои корезӣ аз шишаҳои полиэтиленӣ истифода бурда, намунаҳои оби корезии 30-500 мл;барои љамъоварии обњои канализатсияи њаљми зиёда аз 500 мл сатилњои полиэтиленї ё намунаи об дар мањал таҷҳизоти махсуси ѓанигардонї истифода бурдан мумкин аст.Њамзамон, барои љойгир кардани обњои корезї намунаи бисёрнутъаи таќсимшуда гузаронидан лозим аст.

4. Намунаҳои ҳайвонот: Барои ҳайвонҳои зинда, тампонҳои намунагирӣ метавонанд барои ҷамъоварӣ кардани тампонҳои сатҳи бадан, тампонҳои орофарингеалӣ ва мақъад истифода шаванд ва намунаҳои наҷосат ё секретро низ ҷамъоварӣ ва мувофиқан дар варақаи сабт сабт кардан мумкин аст.Барои намунаҳои ҳайвоноте, ки пӯстро аз сар гузаронидаанд ва ғайра, барои ҷамъоварӣ кардани намунаҳои тампончаи сатҳи бадан ва холигии бадан аз тампонҳои пахта истифода баред.Зарур аст, ки маҳлули муҳофизати вирус дар найчаи намунагирии вирус барои пурра ворид шудан ба тампончаи пахтаи намунавӣ истифода шавад ва сипас татбиқи сатҳи намунаи ғизои ҷамъовардашударо такрор кунед.Шабу бештар аз 3 маротиба.Дар баробари ин, дар сатхи намуна намунагирии бисёрнуқтаҳои тақсимшударо анҷом додан лозим аст.

5. Таҷҳизоти дигар: контейнерҳо барои интиқол ва парвариши ҳайвонот ба монанди қафас ё зарфҳои моҳӣ.Аввалан, намудҳои мушаххаси ҳайвонотро, ки дар контейнер нигоҳ дошта мешаванд ва парвариш карда мешаванд, мушоҳида кунед ё фаҳмед ва намунаҳои тампонро дар девори дохилии контейнер ё намунаҳои моеъи мундариҷа ҷамъ кунед.

6. Намунаҳои аэрозолҳоро дар ҷойҳое, ки одамон ҷамъ мешаванд, ҷойҳои савдои маҳаллӣ, офисҳо ва утоқҳои истироҳатии суст вентилятсияшаванда ҷамъ кунед.

II. Воситаҳои интихоб
1. найчаи гирифтани хун
Агар ба шумо лозим ояд, ки баъдтар санҷиши кислотаи нуклеинӣ ва намунаҳои антикоагулянтро анҷом диҳед, тавсия дода мешавад, ки барои ҷамъоварии хун аз зарфи вакууми дорои антикоагулянти EDTA истифода баред;барои намунаҳои зардоб тавсия дода мешавад, ки рагҳои хунравии вакуумӣ бидуни антикоагулянт истифода шаванд.

2. Тампончаи намунагирӣ

Тавсия дода мешавад, ки ба ҷои тампонҳои алгинати кальций ё тампонҳои дорои сутунҳои чӯбӣ истифода бурдани тампонҳои полипропиленӣ, зеро онҳо метавонанд моддаҳое дошта бошанд, ки баъзе вирусҳоро ғайрифаъол мекунанд ва санҷиши ПТР-ро боздоранд.Тампонҳои сарпӯши пахтаро истифода бурдан мумкин нест, зеро нахҳои пахта адсорбсияи пурқуввати сафеда доранд ва ба маҳлули минбаъдаи консервативӣ ба осонӣ элюта намешаванд.

Дар “Мушаххасоти техникӣ барои ҷамъоварӣ ва ошкор кардани кислотаҳои нави нуклеинҳои коронавируси 10-дар 1” ба таври возеҳ пешбинӣ шудааст, ки “тампончаи намунавӣ бояд аз полиэстер, нейлон ва дигар маводи алгинати ғайрипахта ва калсий сохта шавад ва даста бояд аз маводи чӯбӣ сохта шавад.Нуқтаи шикастан тақрибан 3 см аз болои сари тампон аст, ки шикастан осон аст."

CDC дар Иёлоти Муттаҳида инчунин қайд кард: "Танҳо тампонҳои нахи синтетикиро бо чоҳҳои пластикӣ ё сим истифода баред.Тампонҳои алгинати калсий ё тампонҳои дорои чоҳҳои чӯбиро истифода набаред,зеро онҳо метавонанд дорои моддаҳое бошанд, ки баъзе вирусҳоро ғайрифаъол мекунанд ва санҷиши PCR-ро боздоранд.

Айни замон ба таври васеъ истифода бурда мешавад тампончаи нейлони якдафъаинаи стерилизатсияшуда дар якҷоягӣ бо асои пластикӣ.Тампончаи флока дорои ҷабби об ва суръати озодшавии беҳтар аст.Мувофиқи маконҳои гуногуни интихоб, сари тампон низ андоза ва нахҳои гуногун дорад.Ғафсӣ.»

3. Намунаи ҳалли нигоҳдории нақлиёт

Маҳлули муҳофизати ғайрифаъолкунии вирус: миқдори мувофиқи консентратсияи намаки гуанидин ва ҷузъҳои гуногуни лизиси вирус метавонад вирусро мустақиман лизизатсия кунад, то кислотаи нуклеинро озод кунад, RNase ва DNase-ро ғайрифаъол кунад ва якпорчагии кислотаи нуклеинро таъмин кунад, ки он метавонад барои муайянкунии минбаъдаи qPCR истифода шавад.Онро барои парвариш ва ҷудо кардани вирус истифода бурдан мумкин нест.

Маҳлули интиқол ва нигоҳдории вирус: дорои намакҳо, аминокислотаҳо, витаминҳо, глюкоза ва сафедаҳое, ки барои зинда мондани вирус заруранд, ки метавонанд фаъолияти вирусро нигоҳ доранд.Он метавонад барои истихроҷи кислотаи нуклеинӣ ва ошкор кардани вирус дар оянда истифода шавад ва инчунин метавонад барои парвариш ва ҷудо кардани вирус истифода шавад.

4. Қубури нигоҳдории намуна ва халтаи намуна

Қубури нигоҳдории намуна бояд як найчаи пластикии безарар бо сарпӯши буранда бошад, ки кислотаи нуклеинро адсорб намекунад.Ҳар як найчаи намуна бояд бо халтаи намуна пӯшонида шавад, то ифлосшавӣ ва ифлосшавии намуна пешгирӣ карда шавад.

III.Моддаҳои дахолаткунанда дар намуна

Моддаҳои дахолаткунанда дар таҷрибаҳои PCR

1. интерференсияи эндогенї

Моддаҳои дар намунаи бадан мавҷудбуда метавонанд ба ошкор кардани дигар моддаҳо халал расонанд.

Хун:гем (>1мг/мл), гемин (>0,1нг/мкл), триглицеридҳо, IgG ва ғайра;

Пешоб:Мочевина (20 мм);

Таблет:полисахаридҳои растанӣ, холат;

матоъ:протеаз, коллаген;

Шир: протеаз, ионҳои калсий;

Маводи мухаддир: антибиотикҳо, доруҳои зидди вирусӣ, гормонҳо ва ғайра.

дигар.

2. интерференсияи экзогенї

Он аз моддаҳое меояд, ки метавонанд ба ошкор кардани дигар моддаҳо дар vitro халал расонанд.Иловаҳо ва моддаҳои намунавӣ, ки ҳангоми ҷамъоварӣ ва коркарди намуна метавон тамос гирифт:

Таҷҳизоти санҷишӣ: гели ҷудокунии зардоб, контейнери ҷамъоварии намуна ва стопори резинӣ, катетер, моеъи шустани катетер, хокаи дастпӯшак ва ғ.

Антикоагулянт: гепарин (>0,1 U/mL), EDTA (>0,5 мМ) ва ғайра;

Маҳлулҳои органикӣ: изопропанол (>0,1 IU/мл), бетаин, диметилсулфоксид, формамид, глицерин, ПЭГ ва ғайра;

Дезинфексияҳо: спиртҳо (этанол>1%), альдегидҳо, фенолҳо (фенол>0,2%), пероксидҳо, кислотаҳои сахт (HCL), ишқдори қавӣ (NaOH) ва ғайра;

Шустушӯй:SDS (>0,005%);

Хок: Гумус

Маводи рангубор: Индиго

дигар.

Дар шароити воқеии намунагирии берунӣ, аз қабили ҷамъоварии намунаҳои муҳити зист, намунаҳо метавонанд дорои моддаҳои гуногуни халалдоркунанда бошанд ва таркиби моддаҳои дахолаткунанда дар ҳар як макон гуногун аст, ки таҷрибаҳои дахолати PCR мувофиқи шароити маҳаллӣ гузаронида шаванд.

IV.Шароити нигоҳдорӣ ва интиқоли намуна

Намунаҳои клиникии нав ҷамъовардашуда бояд дар давоми 2-4 соат пас аз ҷамъоварӣ дар ҳарорати аз 2°C то 8°C ба лаборатория фиристода шаванд.Дар ҳарорати 4 ℃ дар давоми 24 соат нигоҳ доред.Намунаҳое, ки барои ҷудокунии вирус ва муайян кардани кислотаи нуклеин истифода мешаванд, бояд ҳарчи зудтар санҷида шаванд.Намунаҳоеро, ки дар давоми 24 соат санҷидан мумкин аст, дар ҳарорати 4°C нигоҳ доштан мумкин аст;Намунаҳое, ки дар давоми 24 соат ошкор карда намешаванд, бояд дар -70°C ё камтар нигоҳ дошта шаванд (агар не - дар 70°C дар яхдон дар -20°С нигоҳ доред).

Хулоса:Ҷамъоварӣ, интиқол ва нигоҳдории намунаҳои стандартӣ барои санҷиши минбаъда муҳим аст.Манфиҳои бардурӯғи бисёре аз озмоишҳои лабораторӣ дар натиҷаи ҷамъоварӣ, интиқол ва нигоҳдории нодурусти намунаҳо ба вуҷуд меоянд, ки ба таназзули кислотаи нуклеинҳои вирусӣ оварда мерасонанд.Бо вуҷуди ин, бисёре аз лабораторияҳо аҳамияти гирифтани намунаро ба назар намегиранд.Умедворам, ки ин мақола метавонад таваҷҷуҳи ҳамагонро ба интихобро бедор кунад ва интихоби илмӣ ва оқилонатар кунад!

Маҳсулоти марбут:

Маҷмӯаи SARS-CoV-2 варианти муайянкунии кислотаи нуклеинӣ (I) (Усули ченкунии флуоресцентии PCR) - Барои ошкор кардани мутантҳо аз Бразилия, Африқои Ҷанубӣ ва Британияи Кабир