Маҷмӯаи изолятсияи вирусии ДНК ва РНК маҷмӯаҳои омодасозии тозакунии ДНК ва РНК
Мушаххасоти
50 омодагӣ, 200 омодагӣ
Маҷмӯаи изолятсияи истихроҷи RNA-и вирусии кислотаи нуклеинӣ сутун ва формулаи аз ҷониби Foregene таҳияшударо истифода мебарад, ки метавонад РНК-и вирусии тоза ва баландсифатро аз намунаҳо ба монанди плазма, хуноба, моеъи бадан аз ҳуҷайра ва супернатанти фарҳанги ҳуҷайра ба таври муассир истихроҷ кунад.Маҷмӯа махсусан акриламиди хатиро илова мекунад, ки метавонад ба осонӣ миқдори ками РНК-ро аз намунаҳо гирад.RNA-танҳо сутун метавонад РНК-ро самаранок пайваст кунад.Маҷмӯа метавонад дар як вақт миқдори зиёди намунаҳоро коркард кунад.
Тамоми маҷмӯа RNase-ро дар бар намегирад, аз ин рӯ РНК-и тозашуда вайрон намешавад.Буфери viRW1 ва буфери viRW2 метавонанд кафолат диҳанд, ки кислотаи нуклеини вирусии ба даст овардашуда аз сафеда, нуклеаз ё дигар ифлосиҳо, ки бевосита барои таҷрибаҳои биологияи молекулярии поёноб истифода мешавад.
Компонентҳои комплект
| Акриламиди хатӣ |
| Буфери DRL |
| Буфери RW1, буфери RW2 |
| RNase-Free ddH2O |
| Сутуни ДНК/РНК |
| Дастурҳо |
Хусусиятҳо ва афзалиятҳо
■ Амалиёт дар ҳарорати хонагӣ (15-25 ℃) дар тамоми раванд, бе ваннаи ях ва центрифугаи ҳарорати паст.
■ Маҷмӯаи мукаммали RNase-Free, дар бораи таназзули РНК хавотир шудан лозим нест.
■ Ҳосили баланди кислотаи нуклеинӣ: Сутуни танҳо барои ДНК/РНК ва формулаи беназир метавонад ДНК ва РНК-ро самаранок тоза кунад.
■ Иқтидори калони коркарди намуна: ҳар дафъа то 200μl намунаҳоро коркард кардан мумкин аст.
■ Суръати тез: кор кардан осон ва дар давоми 20 дақиқа анҷом додан мумкин аст.
■ Бехатарӣ: ягон реактиви органикӣ талаб карда намешавад.
■ Сифати баланд: Порчаҳои тозашудаи РНК дорои тозагии баланд буда, аз сафеда ва дигар ифлосиҳо озоданд ва метавонанд ба барномаҳои гуногуни таҷрибавии поёноб ҷавобгӯ бошанд.
Аризаи маҷмӯа
Он барои истихроҷ ва тоза кардани кислотаи нуклеинҳои вирусӣ дар намунаҳо ба монанди плазма, хуноба, моеъи бадан аз ҳуҷайра ва супернатанти фарҳанги ҳуҷайра мувофиқ аст.
Раванди кор
Диаграмма
Нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ
■ Ин маҷмӯаро дар шароити хушк дар ҳарорати хонагӣ (15-25℃) барои 24 моҳ нигоҳ доштан мумкин аст;агар онро барои муддати дарозтар нигоҳ доштан лозим бошад, онро дар ҳарорати 2-8 ℃ нигоҳ доштан мумкин аст.
■ Маҳлули хаттии акриламидро дар ҳарорати хонагӣ барои 7 рӯз нигоҳ доштан мумкин аст;Пас аз гирифтани маҷмӯа, лутфан онро берун кунед ва дар -20 ° C нигоҳ доред.
■ Пас аз илова кардани акриламиди хатӣ ба буфери DRL, онро дар ҳарорати 2-8°C то 48 соат нигоҳ доштан мумкин аст.Лутфан ҳалли тайёрро истифода баред.
Дастури таҳлили мушкилот
Дар зер таҳлили мушкилоте оварда шудааст, ки ҳангоми истихроҷи ДНК/РНК-и вирусӣ дучор шудан мумкин аст, бо умеди он ки барои таҷрибаҳои шумо муфид бошад.Илова бар ин, барои дигар мушкилоти таҷрибавӣ ё техникӣ, ба истиснои дастурҳои амалиётӣ ва таҳлили мушкилот, мо дастгирии техникии махсус барои кӯмак ба шумо дорем.Агар шумо ягон эҳтиёҷ дошта бошед, лутфан бо мо тамос гиред: 028-83360257 ё почтаи электронӣ:
Tech@foregene.com.
Истеҳсоли кислотаи нуклеинӣ ё ҳосили пасти кислотаи нуклеинӣ вуҷуд надорад
Одатан омилҳои зиёде мавҷуданд, ки ба самаранокии барқарорсозӣ таъсир мерасонанд, ба монанди: таркиби кислотаи нуклеинӣ, усули кор, ҳаҷми элюсия ва ғайра.
Таҳлили сабабҳои умумӣ:
1. Дар давоми амалиёт ваннаи ях ё центрифугаи ҳарорати паст (4°C) анҷом дода шуд.
Пешниҳод: Дар давоми тамоми раванд дар ҳарорати хонагӣ (15-25°C) кор кунед, ваннаи яхкунӣ ва центрифугаи ҳарорати паст накунед.
2. Намуна нодуруст нигоҳ дошта шудааст ё намуна барои хеле дароз нигоҳ дошта шудааст.
Тавсия: Намунаҳоро дар -80°С нигоҳ доред ва аз яхкунӣ ва обшавии такрорӣ худдорӣ намоед;кӯшиш кунед, ки намунаҳои тоза ҷамъовардашударо барои истихроҷи кислотаи нуклеин истифода баред.
3. Лизиси нокифояи намуна.
Тавсия: Лутфан боварӣ ҳосил кунед, ки маҳлули кории намуна ва лизис бодиққат омехта карда мешавад ва дар ҳарорати хонагӣ (15-25°C) барои 10 дақиқа инкубатсия карда мешавад.
4. Иловаи нодурусти элюент.
Пешниҳод: Боварӣ ҳосил кунед, ки RNase-Free ddH2O ба мобайни мембранаи сутуни тозакунӣ ба таври қатра илова карда мешавад ва онро ба ҳалқаи сутуни тозакунӣ напартоед.
5. Ҳаҷми дурусти этаноли мутлақ ба Buffer RW2 илова карда нашудааст.
Пешниҳод: Лутфан дастурҳоро иҷро кунед, ҳаҷми дурусти этаноли мутлақро ба Buffer RW2 илова кунед ва пеш аз истифодаи маҷмӯа хуб омехта кунед.
6. Ҳаҷми намунаи номуносиб.
Пешниҳод: 200μl намуна барои ҳар 500μl Buffer DRL коркард мешавад.Коркарди аз ҳад зиёди намуна боиси паст шудани ҳосили истихроҷи кислотаи нуклеинӣ мегардад.
7. Ҳаҷми элюсияи номуносиб ё элюсияи нопурра.
Тавсия: Ҳаҷми элюенти сутуни тозакунӣ 30-50μl аст;агар таъсири элюсия қаноатбахш набошад, тавсия дода мешавад, ки вақтро дар ҳарорати хонагӣ пас аз илова кардани RNase-Free ddH2O пешакӣ гармшуда дароз кунед, масалан 5-10 дақиқа.
8. Этанол пас аз шустан бо Buffer RW2 дар сутун боқӣ мемонад.
Пешниҳод: Агар этанол пас аз центрифуга бо Buffer RW2 дар тӯли 2 дақиқа боқӣ монад, сутунро метавон дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа пас аз центрифуга ҷойгир кард, то этанол боқимонда пурра хориҷ карда шавад.
Кислотаи нуклеини тозашуда вайрон мешавад
Сифати кислотаи нуклеини тозашуда ба нигоҳдории намуна, ифлосшавии RNase, амалиёт ва дигар омилҳо вобаста аст.Таҳлили сабабҳои умумӣ:
1. Намунаҳои ҷамъовардашуда сари вақт нигоҳ дошта нашудаанд.
Пешниҳод: Агар намуна пас аз ҷамъоварӣ сари вақт истифода нашавад, лутфан онро дар -80°C дар ҳарорати паст фавран нигоҳ доред.Барои истихроҷи РНК кӯшиш кунед, ки намунаҳои тоза ҷамъовардашударо истифода баред.
2. Намунаҳоро ҷамъ кунед ва такроран ях кунед ва об кунед.
Пешниҳод: Ҳангоми ҷамъоварӣ ва нигоҳдории намунаҳо аз яхкунӣ ва обшавӣ (на бештар аз як маротиба) худдорӣ намоед, вагарна ҳосили кислотаи нуклеинӣ кам мешавад.
3. RNase дар ҳуҷраи ҷарроҳӣ ҷорӣ карда мешавад ё дастпӯшакҳои якдафъаина, ниқоб ва ғ.
Тавсия: Таҷрибаҳои истихроҷи РНК беҳтарин дар як ҳуҷраи амалиётии РНК анҷом дода мешаванд ва мизи лабораториро пеш аз таҷриба тоза кардан лозим аст.
Ҳангоми озмоиш дастпӯшакҳо ва ниқобҳои якдафъаина пӯшед, то аз таназзули РНК, ки дар натиҷаи ворид кардани RNase ба вуҷуд омадааст, пешгирӣ кунед.
4. Ҳангоми истифода реактив бо RNase олуда шудааст.
Тавсия: Бо маҷмӯаи нави изолятсияи вирусии ДНК/РНК барои таҷрибаҳои алоқаманд иваз кунед.
5. Қубурҳои центрифуга ва нӯги пипеткаҳое, ки барои коркарди РНК истифода мешаванд, бо RNase олуда шудаанд.
Пешниҳод: Боварӣ ҳосил кунед, ки қубурҳои центрифуга, нӯги пипеткаҳо, пипеткаҳо ва ғ., ки барои истихроҷи РНК истифода мешаванд, ҳама аз RNase озоданд.
Кислотаи тозашудаи нуклеинӣ ба таҷрибаҳои поёноб таъсир мерасонад
ДНК ва РНК, ки аз ҷониби сутуни тозакунӣ тоза карда шудааст, агар миқдори намак ва сафеда аз ҳад зиёд бошад, он ба таҷрибаҳои поёноб таъсир мерасонад, ба монанди: тақвияти PCR, транскрипсияи баръакс ва ғайра.
1. ДНК ва РНК элюташуда ионҳои намаки боқимонда доранд.
Пешниҳод: Боварӣ ҳосил кунед, ки ҳаҷми дурусти этаноли мутлақ ба буфери RW2 илова карда шудааст ва сутуни тозакуниро ду маротиба бо суръати центрифугакунӣ, ки дар дастурҳои истифода нишон дода шудааст, бишӯед;Барои кам кардани ифлосшавии ионҳои намак центрифугаро анҷом диҳед.
2. ДНК ва РНК элюташуда пасмондаҳои этанол доранд.
Пешниҳод: Пас аз тасдиқи шустан бо Buffer RW2, центрифугаи холии найҳоро бо суръати центрифугакунӣ дар дастури истифода иҷро кунед;агар то ҳол боқимондаи этанол мавҷуд бошад, шумо метавонед найчаи холиро центрифуга кунед ва сипас онро дар ҳарорати хонагӣ барои 5 дақиқа ҷойгир кунед, то боқимондаи этанол то ҳадди аксар хориҷ карда шавад.
Дастурҳои дастурӣ:
Дастури дастурии маҷмӯаи изолятсияи вирусии ДНК ва РНК
