Аз даст додани шунавоӣ (HL) бемории маъмултарини маъюбии эҳсосӣ дар одамон аст.Дар кишварҳои пешрафта, тақрибан 80% ҳолатҳои ношунавоӣ дар кӯдакон аз омилҳои ирсӣ ба вуҷуд меоянд.Аз ҳама маъмултарин нуқсонҳои як ген мебошанд (тавре ки дар расми 1 нишон дода шудааст), 124 мутатсияи генӣ бо гумшавии шунавоии ғайрисиндромикӣ дар одамон алоқаманд аст, боқимонда аз омилҳои муҳити зист ба вуҷуд меоянд.Имплантат кохлеарӣ (дастгоҳи электроние, ки дар гӯши дарунӣ ҷойгир аст, ки мустақиман ба асаби шунавоӣ ангезиши барқро таъмин мекунад) то ба ҳол самараноктарин варианти табобати шадиди HL мебошад, дар ҳоле ки дастгоҳи шунавоӣ (дастгоҳи электронии беруна, ки мавҷҳои садоро табдил медиҳад ва тақвият медиҳад) метавонад ба беморони гирифтори HL-и миёна кӯмак расонад.Бо вуҷуди ин, дар айни замон ягон дору барои табобати HL (GHL) вуҷуд надорад.Дар солҳои охир, табобати генӣ ҳамчун як равиши ояндадор барои табобати дисфунксияи гӯши дарунӣ таваҷҷӯҳи бештар пайдо мекунад.

Расми 1.Тақсимоти навъи варианти вобаста ба карӣ.[1]

Ба наздикӣ, олимони Институти Солк ва Донишгоҳи Шеффилд натиҷаи тадқиқотро дар терапияи молекулавӣ - усулҳо ва рушди клиникӣ нашр карданд [2], ки дурнамои васеъи татбиқи терапияи гении in vivo аз карии ирсиро нишон дод.Ури Манор, ёвари профессори пажӯҳишгоҳи Пажӯҳишгоҳи Солк ва директори Маркази Биофотоникаи пешрафтаи Вайт гуфт, ки ӯ бо талафоти шадиди шунавоӣ таваллуд шудааст ва эҳсос мекунад, ки барқарор кардани шунавоӣ тӯҳфаи олиҷаноб хоҳад буд.Тадқиқоти қаблии ӯ нишон дод, ки Eps8 протеини танзимкунандаи актин бо фаъолиятҳои ҳатмӣ ва бастани актин аст;дар ҳуҷайраҳои мӯи кохлеарӣ, маҷмӯи сафедаи Eps8 бо MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 ва GNAI3 асосан дар аксари онҳо мавҷуд аст.Аз ин рӯ, Eps8 метавонад дарозии стереосилияи ҳуҷайраҳои мӯйро танзим кунад, ки барои фаъолияти мӯътадили шунавоӣ муҳим аст;Ҳазф ё мутацияи Eps8 ба стереосилияи кӯтоҳ оварда мерасонад, ки он наметавонад садоро ба сигналҳои электрикӣ барои дарки мағзи сар дуруст табдил диҳад, ки дар навбати худ ба карӣ оварда мерасонад..Ҳамзамон, ҳамкор Уолтер Маркотти, профессори Донишгоҳи Шеффилд, муайян кард, ки ҳуҷайраҳои мӯй дар сурати набудани Eps8 ба таври оддӣ инкишоф ёфта наметавонанд.Дар ин тадқиқот, Манор ва Маркотти якҷо шуданд, то тафтиш кунанд, ки оё илова кардани Eps8 ба ҳуҷайраҳои стереоцилиарӣ метавонад функсияи онҳоро барқарор кунад ва дар навбати худ, шунавоӣ дар мушҳоро беҳтар кунад.Гурӯҳи тадқиқотӣ вектори вируси adeno-associated (AAV) Anc80L65-ро барои интиқол додани пайдарпаии рамзгузории дорои навъи ваҳшӣ EPS8 ба кохлеаи мушҳои навзоди Eps8-/- P1-P2 тавассути сӯзандоруи даврии мембранаи тиреза истифода бурд;дар ҳуҷайраҳои мӯи кохлеарии муш вазифаи стереосилияро пеш аз камолоти онҳо барқарор мекард;ва таъсири таъмир бо технологияи тасвирӣ ва андозагирии стереосилия тавсиф карда шуд.Натиҷаҳо нишон доданд, ки Eps8 дарозии стереосилияро зиёд кард ва функсияи ҳуҷайраҳои мӯйро дар ҳуҷайраҳои басомади паст барқарор кард.Онҳо инчунин дарёфтанд, ки бо мурури замон ҳуҷайраҳо қобилияти наҷот додани ин терапияи гениро гум мекунанд.Маънои ин аст, ки ин табобатро дар бачадон гузаронидан мумкин аст, зеро ҳуҷайраҳои мӯйҳои Eps8-/- метавонанд пас аз таваллуди мушҳо ба камол расида бошанд ё зарари ҷамъшударо барқарор кунанд."Eps8 як протеин аст, ки дорои бисёр вазифаҳои гуногун аст ва ҳоло ҳам барои омӯхтани чизҳои зиёде вуҷуд дорад" гуфт Манор.Тадқиқоти оянда аз омӯзиши таъсири табобати гении Eps8 дар барқарорсозии шунавоӣ дар марҳилаҳои гуногуни рушд ва оё имкон дорад, ки имкони табобатро дароз кунад, дар бар мегирад.Тасодуфан, дар моҳи ноябри соли 2020, профессор КаренБ Авраҳам аз Донишгоҳи Тел-Авив дар Исроил натиҷаҳои худро дар маҷаллаи EMBO Molecular Medicine [3] бо истифода аз технологияи инноватсионии генотерапия барои эҷоди як вируси безарари синтетикии бо адено алоқаманд AAV9-PHP нашр кард.B, Норасоии генӣ дар ҳуҷайраҳои мӯйи Syne4-/- мушҳо тавассути сӯзандоруи вирусе, ки пайдарпаии рамзгузории Syne4-ро ба гӯши дарунии мушҳо ворид мекунад, ислоҳ карда шуд ва ба он имкон дод, ки ба ҳуҷайраҳои мӯй ворид шавад ва маводи генетикии интиқолшударо раҳо кунад ва ба онҳо имкон медиҳад, ки ба таври мӯътадил пухта шаванд ва фаъолият кунанд (чунон ки дар расми 2).

Расми 2.Намоиши схематикии анатомияи гӯши дарунӣ бо таваҷҷӯҳ ба теоргани Корти ва функсияи ҳуҷайравии несприн-4.

Мумкин аст, ки истифодаи генотерапия барои ноил шудан ба маќсади муолиљаи беморињои ирсї дар сатњи ген тавассути ворид кардан, нест кардан ё ислоњ кардани њар гуна генњои мутатсияшуда барои табобат (яъне назорати таѓйироти генетикии беморї) таъсири баланди клиникї дорад.дурнамои татбиқ.Усулҳои кунунии терапияи ген барои карии аз ҷиҳати генетикӣ камбудро ба категорияҳои зерин тақсим кардан мумкин аст:

иваз кардани ген

Иваз кардани ген, эҳтимолан, як шакли "одилона"-и терапияи ген аст, ки ба муайян ва иваз кардани гени ноқис бо нусхаи муқаррарӣ ё ваҳшӣ аз ген асос ёфтааст.Аввалин таҳқиқоти бомуваффақияти табобати гении гӯши дарунӣ барои гум кардани шунавоӣ, ки дар натиҷаи нест кардани гени везикулярии интиқолдиҳандаи глутамат 3 (VGLUT3) ба вуҷуд омадааст;Интиқоли миёнаравии AAV1-и экзогении VGLUT3 дар ҳуҷайраҳои мӯйҳои гӯши дарунӣ (IHCs) метавонад ба барқароршавии устувори шунавоӣ, барқароршавии қисман морфологияи лентаи синаптикӣ ва аксуламалҳои конвульсивӣ оварда расонад [4].Аммо, дар мисолҳое, ки дар муқаддимаи дар боло тавсифшуда ду ивазкунандаи генҳои бо AAV додашуда, қайд кардан муҳим аст, ки моделҳои муше, ки барои намудҳои муайяни ихтилоли ирсии гумшавии шунавоӣ истифода мешаванд, муваққатан аз одамон фарқ мекунанд ва дар мушҳои P1 гӯши дарунӣ дар марҳилаи камолоти рушд қарор дорад.Баръакс, одамон бо гӯши дарунии баркамол таваллуд мешаванд.Ин тафовут истифодаи эҳтимолии натиҷаҳои мушро барои табобати ихтилоли карии ирсии инсон пешгирӣ мекунад, агар терапияи генӣ ба гӯшҳои муши баркамол расонида нашавад.

Таҳрири ген: CRISPR/Cas9

Дар муқоиса бо "иваз кардани ген" рушди технологияи таҳрири генҳо субҳи табобати бемориҳои ирсиро аз реша овард.Муҳим он аст, ки усули таҳрири генҳо камбудиҳои усулҳои анъанавии аз ҳад зиёд экспрессионии генотерапияро, ки барои бемориҳои ирсии карии бартаридошта мувофиқ нестанд ва мушкилоте, ки усули аз ҳад зиёд экспрессия дер давом намекунад, ҷуброн мекунад.Пас аз он ки муҳаққиқони чинӣ махсусан аллели мутант Myo6C442Y-ро дар мушҳои Myo6WT/C442Y бо истифода аз системаи таҳрири генҳои AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 нокаут карданд ва дар давоми 5 моҳи пас аз нокаут мушҳо Функсияи шунавоии модел барқарор шуд;дар баробари ин, инчунин мушоњида карда шуд, ки зинда мондани њуљайрањои мўй дар гўши дарунї бењтар шуда, шакли чиркњо мураттаб гашта, нишондињандањои электрофизиологї ислоњ шудаанд [5].Ин аввалин пажӯҳиш дар ҷаҳон аст, ки технологияи CRISPR/Cas9 барои табобати карии ирсӣ, ки дар натиҷаи мутатсияи генҳои Myo6 ба вуҷуд омадааст, истифода мешавад ва ин як пешрафти муҳими пажӯҳиши технологияи таҳрири генҳо барои табобати карии ирсӣ мебошад.Тарҷумаи клиникии табобат заминаи мустаҳками илмӣ медиҳад.

Усулҳои интиқоли терапияи ген

Барои бомуваффақият анҷом додани терапияи генӣ, молекулаҳои ДНК-и бараҳна наметавонанд аз сабаби гидрофилӣ ва заряди манфии гурӯҳҳои фосфатӣ ба ҳуҷайраҳо ба таври муассир ворид шаванд ва барои таъмини якпорчагии молекулаҳои иловашудаи кислотаи нуклеинӣ усули бехатар ва самаранок интихоб карда шаванд.ДНК-и иловашуда ба ҳуҷайра ё бофтаи мақсаднок интиқол дода мешавад.AAV ба таври васеъ ҳамчун воситаи интиқол барои табобати бемориҳо аз сабаби таъсири баланди сироятӣ, иммуногении паст ва тропизми васеъ ба намудҳои гуногуни бофтаҳо истифода мешавад.Дар айни замон, як қатор корҳои тадқиқотӣ тропизми зертипҳои гуногуни AAV-ро нисбат ба намудҳои гуногуни ҳуҷайраҳои кохлеаи муш муайян кардаанд.Истифодаи хусусиятҳои интиқоли AAV дар якҷоягӣ бо промоутерҳои мушаххаси ҳуҷайра метавонад ифодаи мушаххаси ҳуҷайраҳоро ба даст орад, ки метавонад таъсири берун аз ҳадафро коҳиш диҳад.Илова бар ин, ҳамчун алтернатива ба векторҳои анъанавии AAV, векторҳои нави синтетикии AAV пайваста таҳия карда мешаванд ва қобилияти интиқоли олии гӯшро дар гӯши дарунӣ нишон медиҳанд, ки AAV2/Anc80L65 аз ҳама васеъ истифода мешавад.Усулҳои интиқоли ғайривирусиро метавон боз ба усулҳои физикӣ (микроинъекция ва электропоратсия) ва усулҳои кимиёвӣ (ба липидҳо, полимерҳо ва нанозарраҳои тиллоӣ) тақсим кард.Ҳарду равиш дар муолиҷаи ихтилоли карии ирсӣ истифода шуда, бартариҳо ва маҳдудиятҳои мухталифро нишон доданд.Илова ба воситаи интиқол барои терапияи ген ҳамчун воситаи нақлиёт, усулҳои гуногуни маъмурияти ген дар vivo метавонанд дар асоси намудҳои гуногуни ҳуҷайраҳои мақсаднок, масирҳои маъмурият ва самаранокии терапевтӣ истифода шаванд.Сохтори мураккаби гӯши дарунӣ расидан ба ҳуҷайраҳои мавриди ҳадафро мушкил мекунад ва тақсимоти агентҳои таҳрири геном суст аст.Лабиринти мембрана дар дохили лабиринти устухони устухони муваққатӣ ҷойгир буда, канали кохлеарӣ, канали нимдонавӣ, утрикул ва пуфакро дар бар мегирад.Ҷудошавии нисбии он, гардиши ҳадди ақали лимфа ва ҷудошавӣ аз хун тавассути монеаи лабиринти хун интиқоли самарабахши системавии табобатро танҳо ба мушҳои навзод маҳдуд мекунад.Барои ба даст овардани титрҳои вирусӣ, ки барои табобати ген мувофиқ аст, тазриқи бевоситаи векторҳои вирусӣ ба гӯши дарунӣ зарур аст.Роҳҳои муқарраршудаи тазриқ иборатанд аз [6]: (1) мембранаи тирезаи мудаввар (RWM), (2) трахеостомия, (3) кохлеостомияи эндолимфатикӣ ё перилимфатикӣ, (4) мембранаи мудаввар ва фенестратсияи қубур (CF) (чунон ки дар расми 3).

Расми 3.Интиқоли табобати ген дар гӯши дохилӣ.

Ҳарчанд пешрафтҳои зиёде дар терапияи генҳо ба даст омадаанд, бар асоси ҳадафҳои тарҷумаи клиникӣ, пеш аз он, ки терапияи генӣ ба як варианти аввалини табобат барои беморони гирифтори бемориҳои ирсӣ табдил ёбад, махсусан дар таҳияи векторҳои бехатар ва муассир ва усули интиқол бояд кори бештар анҷом дода шавад.Аммо мо боварӣ дорем, ки дар ояндаи наздик ин намуди табобатҳо як ҷузъи табобати фардӣ мешаванд ва ба ҳаёти одамони гирифтори ихтилоли ирсӣ ва оилаҳои онҳо таъсири хеле мусбат хоҳанд дошт.

Foregene инчунин маҷмӯаи скрининги баландсуръатро барои генҳои мақсаднок ба кор андохтааст, ки зуд аст ва метавонад транскрипсияи баръакс ва реаксияҳои qPCR-ро бидуни истихроҷи РНК иҷро кунад.

Истинодҳои маҳсулот

Маҷмӯаи Cell Direct RT-qPCR — Taqman/SYBR GREEN I

Барои гирифтани маълумоти бештар дар бораи маҳсулот, лутфан тамос гиред:

overseas@foregene.com