Ферментҳои Hot-start Taq васеъ истифода мешаванд.Дар муқоиса бо полимеразаи оддии ДНК, ферменти гарми Taq метавонад аз баъзе амплификацияи ғайримуқаррарӣ ва ташаккули димерҳои праймер пешгирӣ кунад ва метавонад сатҳи муваффақияти амплификацияи генҳои мақсаднокро ба таври муассир беҳтар кунад.Махсусан дар соҳаи санҷиши генетикӣ, ферменти гарми Taq ҳамчун стандарти ҳатмӣ дар саноат муайян карда шудааст ва полимеразаи оддии ДНК набояд истифода шавад.Тавре ки аз боло дида мешавад, ферментҳои гарм-старти Taq васеъ истифода мешаванд.Дар айни замон, дар бозори дохилӣ брендҳои зиёди ферментҳои гарм-старти Taq мавҷуданд, аммо ферментҳои гарми Taq бо сифати баланд кам нестанд.Бо ин қадар маҳсулоти гармтарини Taq enzyme дучор омада, мо чӣ гуна бояд интихоб кунем?

1. Ферментҳои гарми Taq-ро бо самаранокии пурқуввати баланд интихоб кунед

Самаранокии пурзӯркунии PCR бо иҷрои ферментҳои Taq зич алоқаманд аст.Пас аз он ки системаи реаксияи хуби ферментҳои Taq оптимизатсия карда мешавад, самаранокии пурқувваткунӣ аз 95% зиёдтар аст ва диапазони пурқувваткунии миқдори аввалияи қолаб васеъ аст.Амплификацияи қаноатбахшро метавон ҳангоми паст будани мундариҷаи генҳои мақсаднок ба даст овард ва ҳангоми зиёд будани миқдори қолаб заҳролуд шудан осон нест ва давраи амплификацияи экспоненсиалӣ дароз аст.Барои ферментҳои Taq бо кори суст, ҳатто агар системаи реаксия чандин маротиба оптимизатсия карда шуда бошад ҳам, самаранокии пурқувваткунӣ ҳанӯз аз 90% камтар аст, шакли "S"-и каҷи пурқувваткунӣ аён нест, нишебии хурд ва каҷ ҳамвор аст.Вақте ки миқдори қолиб кам аст, онро васеъ кардан мумкин нест ва вақте ки миқдори қолаб зиёд аст, эффекти пурқувваткунӣ идеалӣ нест.Аз ин рӯ, интихоби полимеразҳои ДНК бо самаранокии баланд бардоштани амплификация барои муваффақияти PCR ва qPCR муҳим аст.

2. Enzyme Taq-ро бо қувваи қавӣ фермент интихоб кунед

Қувваи ферментативии ферментҳои Taq ба самаранокии амплификация алоқаманд аст.Умуман, қувваи ферментативии ферменти гарм-старти Taq ҳар қадар қавитар бошад, ҳамон қадар давраи афзоиши экспоненсиалии амплификацияи ПТР дарозтар мешавад, каҷи "S-шакл" маъмултар аст, арзиши сигнали флуоресцентӣ ҳамон қадар баландтар аст ва барои муайянкунии мултиплекси PCR мувофиқтар аст.Полимеразҳои бренди ДНК бо қудрати заиф ферментативӣ метавонанд умуман танҳо реаксияҳои 2-плексро дастгирӣ кунанд.Ҳангоми анҷом додани реаксияҳои 3-плекс, хати каҷи пурқувваткунӣ паст аст, арзиши сигнали флуорессенсия паст аст ва каҷи маъмулии пурқувваткунӣ вуҷуд надорад, аз ин рӯ доварӣ кардани натиҷаҳо душвор аст.

3. Ферментҳои Taq-ро бо ҳассосияти баланд интихоб кунед

Умуман, полимеразаи ДНК дорои самаранокии баланд ва ҳассосияти баланд дорад, аммо номувофиқатиҳо низ мавҷуданд.Агар фаровонии генҳои мавриди ҳадаф аз намунаи амплифатсияшаванда паст бошад, тавсия дода мешавад, ки ҳассосияти амплификацияи ферменти Taq санҷида шавад.Усули маъмултарини муайянкунӣ ин анҷом додани градиенти 10-карата ё 5-каратаи порчаи плазми гени мақсаднок, анҷом додани ташхиси ПТР дар разряди поёнӣ ва интихоби ферменти гарм-старти Taq бо ҳассосияти баландтари муайянкунӣ мебошад.

Аз гуфтаҳои боло дида мешавад, ки тадқиқотчиён бояд мувофиқи талаботи таҷрибавӣ ва шароити маблағгузории худ интихоб кунанд.Беҳтар аз он аст, ки озмоиши пурқувваткунии градиенти афзоянда барои муайян кардани самаранокии пурқувват ва ҳассосияти ферменти гарми оғозкунандаи Taq анҷом дода шавад.

Намунаи Foregene'Так ДНК полимераза:

Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Тавсифи

Foreasy HS Taq DNA Polymerase як полимеразаи ДНК мебошад, ки дар бактерияҳои муҳандисии Escherichia coli бо технологияи рекомбинатсияи ген ифода ёфтааст.Фермент бо буфери беназири реаксия муттаҳид карда мешавад, ки маҳсулотро хеле тобовар ва мувофиқ месозад ва метавонад бевосита лизати намунаро (системаи Foregene Lysis) ҳамчун қолаб барои реаксияҳои ошкор истифода барад.

Ариза

ПЗР-и сифатӣ ва муайянкунии миқдории ПТР қолибҳои тозашуда ва қолибҳои тозанашуда.

Назорати сифат

1.Фаъолияти экзогении нуклеаза ошкор нашудааст

Усули 2.PCR барои ошкор кардани ДНК-и боқимондаи геномӣ бидуни мизбон

3. Он метавонад генҳои як нусхабардориро дар геноми инсон ба таври муассир афзоиш диҳад

4.Дар ҳарорати хонагӣ барои як ҳафта нигоҳ доред, фаъолияти ғайриоддӣ тағир меёбад

Тафсилоти маҳсулот: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/