Ваксинаи mRNA чист?
Ваксинаи mRNA РНК-ро ба ҳуҷайраҳои бадан интиқол медиҳад, то антигенҳои сафеда пас аз тағироти дахлдор дар vitro экспресс ва тавлид кунад ва ба ин васила ба бадан вокуниши иммунии зидди антигенро ба вуҷуд меорад ва ба ин васила қобилияти иммунии баданро васеъ мекунад.[1,3].
Расми 1: Диаграммаи схематикии таъсири тазриқи бевоситаи ваксинаи mRNA [2]
Таснифи ваксинаҳои mRNA
Ваксинаҳои mRNA ба ду намуд тақсим мешаванд:такрорнашавандамРНК вахудтаъминкунандаmRNA: худтаъминкунандаи mRNA на танҳо антигени мақсаднокро рамзгузорӣ мекунад, балки инчунин репликатсияро рамзгузорӣ мекунад, ки имкон медиҳад амплификацияи РНК дохили ҳуҷайра ва механизми ифодаи сафеда.Ваксинаҳои mRNA-и такрорнашаванда танҳо антигенҳои мақсаднокро рамзгузорӣ мекунанд ва дорои минтақаҳои 5' ва 3' тарҷуманашуда (UTR) мебошанд.Онҳо ҳавасмандкунии ҳамаҷонибаи мутобиқшавӣ ва иммунитети модарзодиро таъмин мекунанд, аз ҷумла ифодаи антиген дар situ ва интиқоли сигнали хатар ва дорои барномаҳои зерин мебошанд Хусусиятҳо[2,3]
●Оё метавонад ҳавасмандкунии ҳамаҷонибаи мутобиқшавӣ ва иммунитети модарзодиро таъмин кунад, аз ҷумла ифодаи антиген дар situ ва интиқоли сигнали хатар
●Метавонад аксуламали иммунии "мувозинат", аз ҷумла эффекторҳои гуморалӣ ва ҳуҷайравӣ ва хотираи иммуниро ба вуҷуд орад.
●Метавонад антигенҳои гуногунро бидуни зиёд кардани мураккабии формулаи ваксина муттаҳид созад
●Тавассути ваксинаҳои такрорӣ такмили пайвастаи потенсиали иммуниро метавон ба даст овард ва ба интиқолдиҳанда вокуниши иммунӣ вуҷуд надорад ё кам аст.
●Ваксинаҳои мРНК-и гармии устувор метавонанд интиқол ва нигоҳдории ваксинаҳоро содда кунанд
Тасвири 2: Диаграммаи схематикии ваксинаи mRNA ва механизми ифодаи антигени он [4]
Хусусиятҳои ваксинаҳои mRNA
Дар муқоиса бо ваксинаҳои анъанавӣ, ваксинаҳои mRNA дорои равандҳои соддаи истеҳсолӣ, суръати тези рушд, ниёз ба фарҳанги ҳуҷайра ва арзиши паст доранд.Дар муқоиса бо ваксинаҳои ДНК, ваксинаҳои mRNA лозим нест, ки ба ядро ворид шаванд ва хатари ҳамгироӣ ба геноми мизбон вуҷуд надорад.Давраи ним-ҳаётро бо тағир додан танзим кардан мумкин аст.
Ҷадвали 1: Афзалиятҳо ва нуқсонҳои ваксинаҳои mRNA
|
| Афзалият | Камбудӣ |
| Ваксинаи mRNA | Тадқиқот ва коркарди босуръат, истеҳсоли ваксина танҳо 40 рӯзро мегирад | Вокуниши иммунии нолозимро ба вуҷуд оред
|
| Ноустувории mRNA дар шароити физиологӣ, ба осонӣ вайрон шудан | Барои пешгирӣ кардани мутатсияҳои терапевтӣ ба геном дохил намешавад
| |
| Ба ягон сигнали локализацияи ядрой, транскрипция лозим нест | Самаранокии ҳастаии бехатарӣ бояд тафтиш карда шавад
|
Тасвири 3: Ҷадвали ҷараёни истеҳсол ва омодасозии ваксинаи mRNA [4]
Маҷмӯи изолятсияи RNA Foregene Viral
RT-qPCR осон (як қадам)
Стратегияҳои такмилёфтаи тайёр кардани ваксинаҳои mRNA
Аз сабаби устувории сусти худи mRNA, таназзули осон аз ҷониби нуклеазҳо дар бофтаҳо, самаранокии пасти воридшавии ҳуҷайраҳо ва самаранокии пасти тарҷума, ин камбудиҳо татбиқи ваксинаҳои mRNA-ро маҳдуд мекунанд.Самаранокии тарҷума низ нақши хеле муҳим мебозад.Мошинҳои интиқолро метавон ба векторҳои вирусӣ ва векторҳои ғайривирусӣ (аз ҷумла липосомаҳо, ғайрилипосомаҳо, вирусҳо, нанозаррачаҳо ва ғ.) тақсим кард.Аз ин рӯ, чораҳои дахлдори такмил додан лозим аст.Дар зер стратегияи такмили фармакологӣ барои омодасозии mRNA оварда шудааст[2]
1 Аналогҳои сарпӯшро синтез кунед ё ферментҳои сарпӯшро истифода баред, то мРНК-ро мӯътадил созед ва тарҷумаи протеинро тавассути пайвастшавӣ ба омили ибтидоии тарҷумаи эукариотӣ 4E (EIF4E) афзоиш диҳед.
2 Элементҳоро дар минтақаи 5′-тарҷуманашуда (UTR) ва 3′-UTR танзим кунед, то мРНК-ро мӯътадил созед ва тарҷумаи сафедаро зиёд кунед
3 Илова кардани думи Poly(A) метавонад mRNA-ро мӯътадил созад ва тарҷумаи сафедаҳоро зиёд кунад
4 Нуклеозидҳои тағирёфта барои коҳиш додани фаъолсозии иммунии модарзод ва баланд бардоштани тарҷума
5 Табобат бо RNase III ва тозакунии хроматографияи моеъи сафедаи зуд (FPLC) метавонад фаъолшавии иммуниро коҳиш диҳад ва тарҷумаро афзоиш диҳад
6 Барои зиёд кардани тарҷума пайдарпайҳо ё кодонҳоро оптимизатсия кунед
7 Якҷоя расонидани омилҳои оғози тарҷума ва усулҳои дигар барои тағир додани тарҷума ва иммуногенӣ
Тасвири 4: Раванди истеҳсол ва ҷамъбасти mRNA транскрипсияи in vitro (IVT) [5]
Тайёр кардани миқёси калон ДНК плазмидӣ
Тозакунии ДНК плазмидӣ асосан ифлоскунандаҳоро аз қабили РНК, эндотоксини ДНК-и доирашакл, протеини мизбон ва кислотаи нуклеинии мизбонро хориҷ мекунад ва одатан плазмиди рекомбинантиро ба E. coli табдил медиҳад.E. coli аз ферментатсияи зичии баланд, баъд ҷудошавии сахт ва моеъ ва ҷамъоварии E. coli мегузарад.Сипас E. coli ба лизиси сілтӣ, ҷудокунии марказӣ-моеъи сахт ва равшанкунии микрофилтратсия пас аз лизис, ултрафилтратсия ва консентратсияи пас аз равшанкунӣ ва сипас тозакунии хроматографӣ гузаронида мешавад.
Тозакунии ДНК плазмидӣ:
Маҷмӯаи Mini Foregene General Plasmid
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.мРНК疫苗研究进展及挑战[Ҷ].免疫学杂志, 2016 (05): 446-449.
【2】Парди Н, Хоган МҶ, Портер ФВ ва дигарон.Ваксинаҳои mRNA - давраи нав дар ваксинология [J].Табиат баррасиҳои кашфи маводи мухаддир, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Муқаддима ба ваксинаҳои RNA.Дар: Крампс Т., Элберс К. (тахрир) Ваксинаҳои RNA.Усулҳо дар биологияи молекулавӣ, ҷилди 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA ҳамчун технологияи табдилдиҳандаи таҳияи ваксина барои назорати бемориҳои сироятӣ [J].Терапияи молекулавӣ, 2019.
【5】Серхио Линарес-Фернандес, Селин Лакруа, , Мутобиқсозии ваксинаи mRNA барои мувозинати вокуниши модарзодӣ/мутобиқшавӣ, Тамоюлҳо дар тибби молекулавӣ, Ҷилди 26, нашри 3,2020, Саҳифаҳои 311-323.
Вақти фиристодан: 05-05-2021
