Маҷмӯаи изолятсияи бактериявии ДНК маҷмӯаҳои тозакунии истихроҷи ДНК-и бактериявӣ
Тавсифи маҷмӯа:
ДНК-и геномии баландсифатро аз бактерияҳо дар марҳилаи афзоиши логарифмикӣ зуд тоза кунед.
◮Не ифлосшавии RNase:Сутуни танҳо ДНК, ки маҷмӯа пешниҳод кардааст, имкон медиҳад, ки РНК аз ДНК-и геномӣ бидуни илова RNase ҳангоми таҷриба хориҷ карда шавад ва лабораторияро аз олуда шудани RNase экзогенӣ пешгирӣ кунад.
◮Суръати тез:Foregene Protease нисбат ба протеазаҳои шабеҳ фаъолияти баландтар дорад ва намунаҳои бофтаро зуд ҳазм мекунад;амалиёт оддӣ аст ва амалиёти истихроҷи ДНК-и геномӣ метавонад дар давоми 20-80 дақиқа анҷом дода шавад.
◮Қулай:Сентрифугакунӣ дар ҳарорати хонагӣ анҷом дода мешавад ва барои центрифуга дар ҳарорати пасти 4°C ё боришоти этанол аз ДНК лозим нест.
◮Бехатарӣ:Истеҳсоли реагентҳои органикӣ талаб карда намешавад.
◮Сифати баланд:ДНК-и геномии истихроҷшуда пораҳои калон дорад, РНК надорад, RNase надорад ва миқдори ионҳои ниҳоят паст дорад, ки ба талаботи таҷрибаҳои гуногун ҷавобгӯ буда метавонанд.
◮Системаи микроэлютсионӣ:Он метавонад консентратсияи ДНК-и геномиро афзоиш диҳад, ки барои ошкор ё озмоиши поёноб қулай аст.
Тавсифи
Ин маҷмӯа усули зуд ва осони истихроҷи ДНК-и геномӣ аз фарҳангҳои бактерияҳо (Грам-манфӣ ва Грам-мусбат) аз манбаъҳои гуногунро таъмин мекунад;он метавонад камтар аз 3 мл фарҳангҳои бактерияҳоро дар марҳилаи афзоиши логарифмикӣ коркард кунад (1 × 109 бактерия).Маҷмӯа бо Foregene Protease-и баландсифат мувофиқат мекунад, ки имкон медиҳад 15-50 мкг ДНК-и геномии баландсифат дар давоми 1 соат истихроҷ карда шавад.Илова бар ин, маҷмӯа инчунин метавонад маводи генетикиро ғайр аз геном, ба монанди плазмидҳо, Космид, BAC ва ғайра истихроҷ кунад.
Маводи матритсаи танҳо барои ДНК, ки дар сутуни чарх истифода мешавад, як маводи нави беназири ширкат мебошад, ки метавонад ДНК-ро самаранок ва махсус адсорб кунад.Иқтидори максималии адсорбсияи ДНК 80 мкг аст.Системаи беназири буферӣ ва элюсия метавонад хориҷ кардани РНК, сафедаҳои наҷосат, ионҳо ва дигар пайвастагиҳои органикиро дар ҳуҷайраҳо ба ҳадди аксар расонад.Порчаи ДНК-и геномии истихроҷшуда калон, тозагии баланд, сифати устувор ва боэътимод аст ва андозаи порчаи ДНК тақрибан 23 кб устувор аст.
Мушаххасоти
50 омодагӣ, 100 омодагӣ, 250 омодагӣ
Компонентҳои комплект
| Буфери ML1 |
| Буфери ML2 |
| Буфери PW |
| Буфери ВБ |
| Буфер EB |
| Протеазаи Форген |
| Лизоцим |
| Буфери TE |
| Фақат сутуни ДНК |
| Дастурҳо |
Хусусиятҳо ва афзалиятҳо
-Ифлосшавии RNase вуҷуд надорад: Барои хориҷ кардани РНК дар ДНК-и геномӣ илова кардани RNase лозим нест ва лабораторияро аз олуда шудани RNase экзогенӣ пешгирӣ мекунад.
-Суръати тез: Foregene Protease нисбат ба протеазҳои шабеҳ фаъолияти баландтар дорад ва метавонад намунаҳои шикастаи бактерияҳоро дар муддати кӯтоҳ ҳазм кунад.
-Бароҳатӣ: Сентрифуга дар ҳарорати хонагӣ анҷом дода мешавад ва барои центрифуга дар ҳарорати пасти 4°C ё боришоти этаноли ДНК лозим нест.
-Бехатарӣ: истихроҷи реагенти органикӣ талаб карда намешавад.
-Сифати баланд: Қисмҳои ДНК-и геномии истихроҷшуда калонанд, РНК надоранд, RNase надоранд ва мундариҷаи ионҳои хеле кам доранд, ки метавонанд ба талаботи таҷрибаҳои гуногун ҷавобгӯ бошанд.
Аризаи маҷмӯа
Ин маҷмӯа барои тоза кардани ДНК-и геномии намунаҳои зерин мувофиқ аст: Бактерияҳои грам-манфӣ ва бактерияҳои грам-мусбат дар марҳилаи афзоиши логарифмикӣ.
Раванди кор
Нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ
-Ин маҷмӯаро дар шароити хушк дар ҳарорати хонагӣ (15-25°С) барои 12 моҳ нигоҳ доштан мумкин аст;агар онро муддати дарозтар нигох доштан лозим бошад, онро дар харорати 2—8°С нигох доштан мумкин аст.
Эзоҳ: Агар дар ҳарорати паст нигоҳ дошта шавад, маҳлул ба боришот моил аст.Пеш аз истифода, боварӣ ҳосил кунед, ки маҳлулро дар маҷмӯа дар ҳарорати хонагӣ барои муддати муайян гузоред.Агар лозим бошад, онро дар ваннаи обии 37°С дар давоми 10 дақиқа пеш гарм кунед, то боришот ҳал шавад ва пеш аз истифода онро омехта кунед.
-Махлули Foregene Protease дорои формулаи беназир аст, ки он дар ҳарорати хонагӣ муддати тӯлонӣ (3 моҳ) нигоҳ дошта мешавад;ҳангоми дар ҳарорати 4°С нигоҳ доштан, фаъолият ва устувории он беҳтар мешавад, бинобар ин тавсия дода мешавад, ки онро дар ҳарорати 4°С нигоҳ доред, фаромӯш накунед, ки онро дар -20°С нигоҳ доред.
-Лизоцим хокаи хушк аст, ки хангоми дар 2—8°С муддати дароз (3 мох) нигох доштан фаъол аст.Барои нигоҳдории дарозмуддат, лутфан онро дар -20 ° C нигоҳ доред.
