Истеҳсолкунандаи Чин барои 2 × премикси концентратӣ барои намунаи тозанашуда дар вақти воқеии миқдорӣ PCR мустақими Multiplex зонд Qpcr Mix Plus U
Ташкилот консепсияи тартиби "менеҷменти илмӣ, афзалияти сифат ва самаранокӣ, харидор олӣ барои Чин Истеҳсолкунандаи 2 × Premix концентратӣ барои намунаи тозанашавандаи миқдорӣ дар вақти воқеии PCR мустақими Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, бизнеси мо бахшида шудааст, ки ба мизоҷон маҳсулоти босифат ва бехатарро бо ҳар як нарх ва хидматҳои хашмгин пешкаш кунад.
Ташкилот концепцияи тартиби «идоракунии илмй, афзалияти сифат ва самаранокии баланд, харидори олиро бароиЧин Taq DNA Polymerase ва Qpcr, Ширкати мо дорои қудрати фаровон ва дорои системаи устувор ва мукаммали шабакаи фурӯш аст.Мо мехоҳем, ки бо ҳама муштариён аз дохил ва хориҷа дар асоси манфиатҳои мутақобила муносибатҳои тиҷорӣ барқарор кунем.
Принсипҳои тарроҳии праймери PCR дар вақти воқеӣ
Праймери пеш ва праймери баръакс
Барои PCR Real Time тарҳрезии праймер хеле муҳим аст.Примерҳо ба хусусият ва самаранокии пурқувваткунии PCR алоқаманданд ва метавонанд бо истинод ба принсипҳои зерин тарҳрезӣ шаванд:
- Дарозии ибтидоӣ: 18-30bp.
- Мазмуни GC: 40-60%.
- Арзиши Tm: Нармафзори тарроҳии Primer, ба монанди Primer 5, метавонад арзиши Tm-и праймерро диҳад.Қиматҳои Tm-и праймерҳои боло ва поён бояд ба қадри имкон наздик бошанд.Формулаи ҳисобкунии Tm низ метавонад истифода шавад: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ҳангоми иҷрои ПЗР, одатан ҳамчун ҳарорати гармкунӣ ҳарорат аз арзиши ибтидоии Tm аз 5 °C интихоб карда мешавад (афзоиши мувофиқ дар ҳарорати гармкунӣ метавонад хусусияти реаксияи ПЗР-ро зиёд кунад).
- Примерҳо ва маҳсулоти PCR:
- Дарозии маҳсулоти афзояндаи праймери тарроҳии PCR беҳтараш 100-150б.
- Праймерҳои тарроҳӣ дар минтақаи дуюмдараҷаи сохтории қолаб бояд то ҳадди имкон пешгирӣ карда шаванд.
- Аз ташаккули 2 ё зиёда пойгоҳҳои иловагӣ дар байни 3′ охири праймерҳои болооб ва поёноб канорагирӣ кунед.
- Пойгоҳи терминали Primer 3' наметавонад бо 3 пайдарпайи G ё C мавҷуд бошад.
- Худи праймерҳо наметавонанд сохторҳои иловагиро дошта бошанд, вагарна сохтори мӯй ба вуҷуд меояд, ки ба тақвияти PCR таъсир мерасонад.
- ATCG бояд ба қадри имкон дар пайдарпаии ибтидоӣ тақсим карда шавад ва аз пойгоҳи терминали 3' бояд ҳамчун T пешгирӣ карда шавад.
Замима1:Cell DirectRT-qPCR Маҷмӯаи компонентт бастаи иловагӣ
1. Маҳлули лизиси ҳуҷайра
Маҳлули лизиси ҳуҷайра | |||
Компонентҳои комплект (24-чоҳ системаи лизис / чоҳ) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
ҚисмиИ | Буфери CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфери ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
ҚисмиII | ДНК хаткӯркунак | 400 мкл | 1 мл × 2 |
RT Mix | |
Компонентҳои комплект (Системаи реаксия 20 мкл) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5 × Омехтаи мустақими RT | 800 мкл |
RNase-Free ddH2O | 1,7 мл × 2 |
qPCR омехта | ||
Компонентҳои комплект (Системаи реаксия 20 мкл) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2 × мустақими qPCR Mix-Taqman | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
20 × Ранги истинод ROX | 40 мкл | 200 мкл |
RNase-Free ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |
Ташкилот консепсияи тартиби "менеҷменти илмӣ, афзалияти сифат ва самаранокӣ, харидор олӣ барои Чин Истеҳсолкунандаи 2 × Premix концентратӣ барои намунаи тозанашавандаи миқдорӣ дар вақти воқеии PCR мустақими Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, бизнеси мо бахшида шудааст, ки ба мизоҷон маҳсулоти босифат ва бехатарро бо ҳар як нарх ва хидматҳои хашмгин пешкаш кунад.
Истеҳсолкунандаи Чин бароиЧин Taq DNA Polymerase ва Qpcr, Ширкати мо дорои қудрати фаровон ва дорои системаи устувор ва мукаммали шабакаи фурӯш аст.Мо мехоҳем, ки бо ҳама муштариён аз дохил ва хориҷа дар асоси манфиатҳои мутақобила муносибатҳои тиҷорӣ барқарор кунем.
Принсипҳои тарроҳии праймери PCR дар вақти воқеӣ
Праймери пеш ва праймери баръакс
Барои PCR Real Time тарҳрезии праймер хеле муҳим аст.Примерҳо ба хусусият ва самаранокии пурқувваткунии PCR алоқаманданд ва метавонанд бо истинод ба принсипҳои зерин тарҳрезӣ шаванд:
- Дарозии ибтидоӣ: 18-30bp.
- Мазмуни GC: 40-60%.
- Арзиши Tm: Нармафзори тарроҳии Primer, ба монанди Primer 5, метавонад арзиши Tm-и праймерро диҳад.Қиматҳои Tm-и праймерҳои боло ва поён бояд ба қадри имкон наздик бошанд.Формулаи ҳисобкунии Tm низ метавонад истифода шавад: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ҳангоми иҷрои ПЗР, одатан ҳамчун ҳарорати гармкунӣ ҳарорат аз арзиши ибтидоии Tm аз 5 °C интихоб карда мешавад (афзоиши мувофиқ дар ҳарорати гармкунӣ метавонад хусусияти реаксияи ПЗР-ро зиёд кунад).
- Примерҳо ва маҳсулоти PCR:
- Дарозии маҳсулоти афзояндаи праймери тарроҳии PCR беҳтараш 100-150б.
- Праймерҳои тарроҳӣ дар минтақаи дуюмдараҷаи сохтории қолаб бояд то ҳадди имкон пешгирӣ карда шаванд.
- Аз ташаккули 2 ё зиёда пойгоҳҳои иловагӣ дар байни 3′ охири праймерҳои болооб ва поёноб канорагирӣ кунед.
- Пойгоҳи терминали Primer 3' наметавонад бо 3 пайдарпайи G ё C мавҷуд бошад.
- Худи праймерҳо наметавонанд сохторҳои иловагиро дошта бошанд, вагарна сохтори мӯй ба вуҷуд меояд, ки ба тақвияти PCR таъсир мерасонад.
- ATCG бояд ба қадри имкон дар пайдарпаии ибтидоӣ тақсим карда шавад ва аз пойгоҳи терминали 3' бояд ҳамчун T пешгирӣ карда шавад.
Замима1:Cell DirectRT-qPCR Маҷмӯаи компонентт бастаи иловагӣ
1. Маҳлули лизиси ҳуҷайра
Маҳлули лизиси ҳуҷайра | |||
Компонентҳои комплект (24-чоҳ системаи лизис / чоҳ) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
ҚисмиИ | Буфери CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфери ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
ҚисмиII | ДНК хаткӯркунак | 400 мкл | 1 мл × 2 |
RT Mix | |
Компонентҳои комплект (Системаи реаксия 20 мкл) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5 × Омехтаи мустақими RT | 800 мкл |
RNase-Free ddH2O | 1,7 мл × 2 |
qPCR омехта | ||
Компонентҳои комплект (Системаи реаксия 20 мкл) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2 × мустақими qPCR Mix-Taqman | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
20 × Ранги истинод ROX | 40 мкл | 200 мкл |
RNase-Free ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |
Дастурҳои дастурӣ: