Маҷмӯаи EndoFree Maxi Plasmid (Сутуни чархзананда)
Тавсифи
Маҷмӯаи EndoFree Maxi Plasmid як усули беназири адсорбсияи мембранаи кремнийро барои самаранок ва махсус пайваст кардани ДНК плазмидӣ қабул мекунад.Бо омезиши махсуси буфери бартарафсозии эндотоксин P4 ва сутунҳои филтратсияи EndoFree Maxi, эндотоксин, сафедаҳо ва дигар ифлосиҳо метавонанд самаранок хориҷ карда шаванд.Тамоми раванди истихроҷ ҳамагӣ 1 соатро мегирад, ки кори қулай ва зудро таъмин мекунад.
Миқдори тавсияшудаи бактерияҳо барои ҳар як амал: Барои плазмиди баланд нусхабардорӣ тавсия дода мешавад, ки 100 мл васоити фарҳангии бактерияҳо истифода шавад ва ҳосили он одатан тақрибан 500-1500 мкг аст.Барои плазмиди кам нусхабардорӣ, 200 мл васоити фарҳангии бактерияҳо тавсия дода мешавад, ки тақрибан 200-600 мкг плазмидҳоро тавлид кунанд.
Компонентҳои комплект
Маҳсулот Компонентхо | D909-E(10 омодагӣ) |
Буфери BL | 30 мл |
Буфери P1 | 100 мл |
Буфери P2 | 100 мл |
Буфери P4 | 100 мл |
Буфери DW2 | 44 мл |
Буфер EB | 30 мл |
RNase A (10 мг/мл) | 1 мл |
Сутунҳои чархзании DNAPure Maxi | 10 дона |
Сӯзандоруи филтри FinePure Maxi | 10 дона |
50 мл қубурҳои коллексия | 10 дона |
Муайян кардани консентратсияи ДНК плазмидӣ ва тозагӣ
Покӣ ва консентратсияи ДНК-и плазмиди истихроҷшударо тавассути электрофорези гели агарозӣ ва спектрофотометри ултрабунафш муайян кардан мумкин аст.Арзиши OD260 1 ба тақрибан 50 мкг/мл ДНК-и дуқабата мувофиқ аст.Арзиши OD260/OD280-и ДНК-и плазми тозашуда одатан дар доираи 1,7-1,9 аст.ДНК-и плазмиди тозашударо мустақиман ба таҷрибаҳо бо талаботи тозагии баланд, ба монанди интиқоли ҳуҷайра ё таҷрибаҳои in vivo истифода бурдан мумкин аст.
Аризаи маҷмӯа
ДНК-и плазмиде, ки аз ин маҷмӯа истихроҷ шудааст, метавонад ба амалиётҳои гуногуни муқаррарӣ, аз ҷумла ҳозимаи ферментативӣ, ПТР, пайдарпайкунӣ, ligation, трансформатсия ва инчунин трансфекция барои намудҳои гуногуни ҳуҷайраҳо татбиқ карда шавад.
Нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ
Маҷмӯаи EndoFree Maxi Plasmid метавонад дар ҳарорати хонагӣ (15-25°C) дар шароити хушк то 12 моҳ нигоҳ дошта шавад.Пеш аз истифодаи аввал ба буфери P1 RNase A илова кунед, хуб омехта кунед ва дар 2-8°С нигоҳ доред.Омехтаро дар давоми зиёда аз 6 моҳ устувор нигоҳ доштан мумкин аст.