Маҷмӯи мустақими RT-qPCR
Тавсифи маҷмӯа:
◮ Маҷмӯаи мустақими RT-qPCR бо истифода аз Foreasy Reverse Transscriptase ва Foreasy HS Taq DNA Polymerase, ки аз ҷониби Foregene таҳия шудааст, бо буфери беназири реаксия, ин маҷмӯаро бо муқовимати қавӣ ва мутобиқати он месозад ва он метавонад мустақиман реаксияро истифода аз системаи Foregene Lysis ҳамчун қолаб озмоиш кунад.Ин маҷмӯа метавонад барои таҳияи маҷмӯаи кашфи кислотаи нуклеинӣ COVID-19 ва дигар бактерияҳои патогенӣ барои таҳияи маҷмӯаи муайянкунии кислотаи нуклеинӣ муроҷиат кунад.
Тавсифи
Маҷмӯаи мустақими RT-qPCR буфери алоҳида бастабандишудаи RT-qPCR ва ферментҳои самараноки баландро таъмин мекунадомехта (Taq、M-MLV、RI), онро барои эҷоди маҷмӯаҳои пушти сар ва система қулай мегардонадтасҳеҳ, дар доираи санҷиши оддӣ.
Мушаххасоти
500Т, 50000Т
Компонентҳои комплект
| Мундариҷаи маҷмӯа (Системаи реаксия 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 Т | 50 000 Т | |
| Омехтаи бевоситаи ферментҳо | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2 × Буфери мустақими RT-qPCR | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Дастур | 1 | 1 |
Қадамҳои амалиёт
Пеш аз тайёр кардани реагент, ҳамаи реактивҳои дар маҷмӯа бояд дар ҳарорати хонагӣ обшуда ва нарм омехта карда шаванд.
A: Тайёр кунед of шаблон ва реактив
1. Шаблони омодашудаи RNA (Маҷмӯаи силсилаи Foregene Total RNA Isolation Kit барои истихроҷ ва тоза кардани қолаби RNA тавсия дода мешавад) ё маҳсулоти крекинги намуна (Истифодаи системаи Foregene Lysis тавсия дода мешавад), праймерҳои мушаххас (10 мкМ) ва дигар масолеҳи зарурӣ, асбобро омода кунед.
2. Буфери 2× Direct RT-qPCR, RNase-Free ddH2O ва 20× ROX Reference Dye (агар он бошад) ҷойгир кунед'с лозим) дар қуттии бо ях, қабули ин обшавии табиӣ, ва нарм омехта.
B: Тайёр кунед of RT-qPCR система
Ҷадвал 1 : Тайёр кунед of RT-qPCR sсистема
| Компонент | Ҳаҷм | Консентратсияи ниҳоӣ |
| 2 × Буфери мустақими RT-qPCR | 10 мкл | 1× |
| Омехтаи бевоситаи ферментҳо | 1мкЛ | |
| Примери пеш (10 μM) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Примери баръакс (10 мкм) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Зонд (4 мкм) | 1мкЛ | 200нМ |
| Шаблон (РНК ё Лизат) | X мкл | |
| 20 × Ранги истинод | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) мкл | |
| Ҳаҷми умумӣ | 20мкЛ |
C: Танзим ба RT-qPCR реаксия барнома
Ҷадвал 2 : RT-qPCR реаксияon барнома танзим (барои мисол: ду-қадам усул)
| Қадам | Ҳарорат | Вақт | Сиклҳо | Мундариҷа | |
| 1 | 50℃ | 15 дақиқа | 1* | 1 | Транскрипсияи баръакс |
| 2 | 95℃ | 1 дақ | 1 | Пеш аз денатуратсия | |
| 3 | 95℃ | 10 сония | 40-45 | Денатуратсия | |
| 60℃ | 30 сония 2* | Андоза/васеъ | |||
Нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ
-Маҷмӯа бояд дар -20 нигоҳ дошта шавад± 5℃.Муҳлати эътибор 12 моҳ аст.
-Аз давраҳои такрории яхкунӣ ва обшавӣ худдорӣ кунед (<5 давра).
